实验4-肝微粒体制备20121108讲课.pdfVIP

实验五 肝微粒体制备及相关酶活性测定 肝脏损伤的检测与评价 评价化学毒物引起肝损害的方法有两大类： 1. 体内实验（in vivo test） 即整体动物试验 2. 体外实验（in vitro test） 1. 体内试验 方法是将肝毒物给予受试动物，然后 处死动物或在动物存活的情况下进行各种 生物检测，如动物染毒后的血清酶学分析、 肝脏排泄与分泌功能测定、肝脏化学组成 分析以及肝脏损害的组织病理学检查等。 2. 体外试验 是指采用某种实验技术从动物机体分 离出肝脏或肝细胞的亚细胞结构，让其在 体外与肝毒物接触一定时间，然后进行各 种检测，如动物的离体肝灌流试验、肝细 胞原代培养与肝细胞毒性试验、肝匀浆毒 物代谢试验等。 一、本次实验的目的和原理 1.微粒体是指在细胞匀浆和差速离心过程 中获得的由破碎的内质网自我融合形成的 近似球形的膜囊泡状结构，包含内质网膜 和核糖体两种基本成分，在体外实验中具 有蛋白质合成、蛋白质糖基化和脂类合成 等内质网的基本功能。 2.肝脏或其他组织磨碎 (均质化)之后，微 粒体能够在不同的离心速度之下，从其他 的细