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实验一:胡萝卜直根愈伤组织的诱导;一、实验目的;二、实验原理;三、实验结果;?;Medium
(Group);四、思考题;2.为什么选择外植体时选取胡萝卜根部形成层部分?;实验二、新疆地区烟粉虱DNA的提取;背景;实验目的;1.材料处理,匀浆前向样本中加入不超过50 μl Buffer GTL,匀浆后加入 100 μL Buffer GTL。
2.加入20 μl Proteinase K,涡旋荡使样品彻底混匀。56℃水浴2小时,直至组织完全裂解,孵育过程中可每隔一段时间颠倒或震荡离心管使样品分散。
3.加入200 μl Buffer GL,涡旋震荡震充分混??,加入200 μl无水乙醇,涡旋震荡充分混匀。
4.短暂离心,将步骤3所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱(Spin Columns DM)中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。10,000 rpm(~13,400×g )离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。;5.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),10,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),10,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7.12,000 rpm离心2分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
8.将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-200 μlBuffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,10,000 rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。;结果分析;实验三:新疆石河子地区烟粉虱Q型生物型的PCR扩增;PCR反应体系:;反应程序:;实验结果;实验四:基因的克隆;一、技术路线;二、实验原理; TA 克隆不需使用含限制酶序列的引物,不需将 PCR 产物进行优化,不需把 PCR 产物做平端处理,不需在 PCR 扩增产物上加接头,即可直接进行克隆。;三、实验方法;四、实验结果
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