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固相萃取机理 胡艳云 固相萃取 定义：利用固相吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱，达到分离和和富集的目的。 分离：杂质保留或目标化合物保留。 富集：目标化合物保留，化合物极性与吸附剂极性越接近，保留越强。 分离机理：利用杂质或目标化合物与样品基体溶剂和吸附剂之间亲和力的相对大小。 模式 反相萃取 正相萃取 离子交换萃取 免疫亲和 有机溶剂非极性顺序 正己烷环己烷四氯化碳甲苯苯无水乙醚氯仿二氯甲烷四氢呋喃乙酸乙酯丙酮乙腈异丙醇甲醇水乙酸 反相萃取（Reversed-Phase) 反相：吸附剂是非极性或弱极性的，如硅胶键合C18,C8, C4，C2,-苯基等. 应用：可以从强极性的溶剂中吸附是非极 性到中等极性的化合物。 作用机理:非极性-非极性相互作用 范德华力或色散力 硅胶键合C18（ODS） ODS: octadecyl-silica (硅胶键合C18) ENVI-C18:键端封尾处理,去除硅胶表面残留的硅醇基,改善其对碱性或酸性化合物的吸附或拖尾.碳含量增大,对非极性化合物的保留容量增大. 应用：中等极性到非极性化合物,如抗生素、咖啡因、药物、染料、芳香油、脂溶性维生素、杀菌剂、除草剂、农药、碳水化合物、苯酚、 类固醇、表面活性剂、茶碱等 洗脱溶剂：甲醇、乙腈、 丙酮及乙酸乙酯等 HLB柱 HLB: hydrophilic-lipophillic balance，亲脂的二乙烯基苯和亲水的N-乙烯基吡咯烷酮按比例聚合 和硅胶键合C18（ODS)比较： pH适用范围1-14 柱子不怕抽干，碳链不会塌陷 可以调节样品溶液的pH值来选择性的保留酸性、中性和碱性化合物。 高保留性 其他反相吸附剂 C8：与C18相似，适合于非极性到中等极性的化合物，对非极性化和物的保留较C18稍弱。 -苯基：与C8类似 -C4：疏水性弱，适合于多肽和蛋白质的 萃取。 聚合物吸附剂：如苯乙烯-二乙烯基苯共聚物，用来保留含有亲水基团的疏水性物质，如芳香族化合物等。 化合物的极性和吸附剂的极性越接近，产生的吸附越强。 正相萃取(Normal-Phase) 吸附剂：极性键合相，如硅胶键合－NH2、－CN，-Diol（二醇基）；极性吸附剂，如silica、florisil、(A-,N-,B-)alumina、硅藻土等 作用机理： 1）极性-极性相互作用 2）表面硅羟基、铝羟基与极性化合物的极性官 能团之间相互作用，包括氢键，π-π键等。 3）偶极-偶极相互作用 4）偶极-诱导偶极相互作用 应用：从非极性溶剂样品中吸附极性化合物 硅胶柱(silica) 表面－SiOH,中等强度的吸附剂，适用于从非极性基体中吸附极性化合物。 硅胶是一种酸性吸附剂，可以吸附酸性（有机酸类）或中性的极性化合物，由于表面的硅醇基可以释放出弱酸性的氢离子，又作为一种弱酸性阳离子交换剂，吸附碱性化合物（生物碱类，胺类）。 活性（吸附性）与硅胶的含水量有关，根据其中含水量不同分为不同的活性等级。 硅胶的活化：加热到100-110度，除去表面吸附的水份，当温度升到500度，表面的硅醇基脱水变成硅氧烷键，从而丧失吸附性。 硅胶极亲水：分析的样品溶液必须无水。 备注：硅胶净化时，一般杂质保留在柱上，目标化合 物流出。 氧化铝(Alumina) 表面含有铝羟基，一种强极性吸附剂，通过与极性化合物和不饱和化合物形成氢键而产生吸附 根据形成条件不同分为酸性、中性和碱性氧化铝。 1）酸性：用1%盐酸浸泡后，用蒸馏水洗至氧化铝的悬浮液pH为4，用于分离酸性物质或对酸稳定的中性物。 2）中性：水洗至中性 ，用于分离中性物。如醛、酮、酯、醌等类有机物质 3）碱性：用于胺或生物碱的分离。 根据含水量的不同，分为不同的活性等级。 化合物的吸附性与其极性成正比，各种化合物对氧化铝的吸附性顺序为：酸和碱 醇、胺、硫醇 酯、醛、酮 芳香族化合物 卤代物、醚 烯 饱和烃 注意：样品溶液中不含水 石墨化碳黑（GCB) GCB: Graphitized carbon black 强吸附剂，可用作极性或非极性样品中极性或非极性有机化合物的吸附，对芳香族化合物的吸附大于脂肪族化合物,对大分子的吸附大于对小分子化合物的吸附。 在水溶液中吸附性大于有机溶剂中的吸附性。 吸附机理：1）通过碳链产生疏水性作用2）表面带部分正电荷而产生静电作用，吸引带电负性集团的化合物 洗脱溶剂一般选用极性较弱的溶剂，如甲苯，二氯甲烷等，极性较强的溶剂如甲醇，乙腈等一般很难将强吸附的的物质洗脱下来。 极性键合固定相 -NH2（氨基）：较强的氢键结合能力，对某些多官能团化合物如甾体、强心甙等有较好的分