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第2讲 生物实验方法和科学思维程序
考点(一) 生物学科学的实验方法
同位素标记法
[典例1] (2017·全国卷Ⅰ)根据遗传物质的化学组成,可将病毒分为RNA病毒和DNA病毒两种类型。有些病毒对人类健康会造成很大危害。通常,一种新病毒出现后需要确定该病毒的类型。
假设在宿主细胞内不发生碱基之间的相互转换。请利用放射性同位素标记的方法,以体外培养的宿主细胞等为材料,设计实验以确定一种新病毒的类型。简要写出(1)实验思路,(2)预期实验结果及结论即可。(要求:实验包含可相互印证的甲、乙两个组)
[解析] (1)在用放射性同位素标记法对新病毒进行鉴定时,要找出DNA和RNA在化学组成上的区别。题中假设在宿主细胞内不发生碱基之间的相互转换,就是引导考生从DNA和RNA的碱基组成上进行分析。因此,使病毒中的DNA或RNA的特殊碱基(DNA为胸腺嘧啶,RNA为尿嘧啶)带上标记,根据病毒中放射性标记的检测结果就可做出判断。由于病毒不能在培养基上独立生活,其增殖时的原料只能来自宿主细胞,所以实验中需配制两种培养基,记为甲组和乙组,甲组含有放射性标记的尿嘧啶,乙组含有放射性标记的胸腺嘧啶,分别加入等量的宿主细胞使宿主细胞带上相应标记,之后接种新病毒,培养一段时间后,收集病毒并检测其放射性。(2)本实验有两种不同的结果:一种是甲组有放射性,乙组无,则该新病毒为RNA病毒;另一种为乙组有放射性,甲组无,则该新病毒为DNA病毒。
[答案] (1)思路:
甲组:将宿主细胞培养在含有放射性标记尿嘧啶的培养基中,之后接种新病毒。培养一段时间后收集病毒并检测其放射性。
乙组:将宿主细胞培养在含有放射性标记胸腺嘧啶的培养基中,之后接种新病毒。培养一段时间后收集病毒并检测其放射性。
(2)结果及结论:
若甲组收集的病毒有放射性,乙组无,则为RNA病毒;反之为DNA病毒。
eq \a\vs4\al([方法归纳])
1.同位素标记法的一般研究过程
eq \x(明确研究对象的生命活动规律)→eq \x(确定与其密切相关的化合物)→eq \x(选择恰当的同位素)→eq \x(用含同位素的物质处理细胞或生物)→eq \x(追踪物质的运行及变化规律)
2.同位素标记法的应用归类及例析
类型一:标记某元素,追踪其转移途径
例析
如用18O标记Heq \o\al(18,2)O,光合作用只产生18O2;再用18O标记C18O2,光合作用只产生O2,证明光合作用产生的O2中的O全部来自H2O,而不是来自CO2
类型二:标记特征元素,探究化合物的作用
例析
如噬菌体侵染大肠杆菌的实验中,用32P标记噬菌体的DNA,侵染后,大肠杆菌体内发现放射性物质;用35S标记噬菌体的蛋白质外壳,侵染后,大肠杆菌体内未发现放射性物质,由此证明了DNA是噬菌体的遗传物质
类型三:标记特征化合物,探究详细的生理过程,研究生物学原理
例析
如用3H标记亮氨酸,探究分泌蛋白的分泌过程;用3H标记胸腺嘧啶脱氧核苷酸,研究有丝分裂过程中染色体的变化规律;用15N标记DNA,证明DNA复制的方式是半保留复制
假说—演绎法
[典例2] 猫是XY型性别决定的二倍体生物,有尾基因(B)对无尾基因(b)为完全显性,且位于性染色体上。现有各种纯种猫若干只,请利用一次杂交实验来确定这对等位基因是位于X染色体的同源Ⅰ片段上还是位于非同源Ⅱ片段上,写出亲本的杂交组合,并预测实验结果。
(1)亲本交配组合:____________________。
(2)预测实验结果:
若______________________________,则这对等位基因位于X染色体同源Ⅰ片段上;
若______________________________,则这对等位基因位于X染色体非同源Ⅱ片段上。
[解析] 确定基因位于X或Y染色体某一片段上可采用假说—演绎法。在解此题时,可假设该等位基因位于X染色体同源Ⅰ片段上,Y染色体上有对应的等位基因,纯合雄猫的基因型可表示为XbYb、XBYB;若等位基因位于X染色体非同源Ⅱ片段上,则Y染色体上没有对应的等位基因,雄猫的基因型可表示为XbY、XBY。利用一次杂交实验来确定该等位基因位于X染色体的哪个片段上,可以选择XbXb×XBYB或XbXb×XBY;若这对等位基因位于X染色体同源Ⅰ片段上,则基因型为XbXb的雌猫与基因型为XBYB的雄猫进行杂交,后代中无论雄性个体还是雌性个体都为有尾猫。若这对等位基因位于X染色体非同源Ⅱ片段上,则基因型为XbXb的雌猫与基因型为XBY的雄猫杂交,子代中雌性个体为有尾猫,雄性个体为无尾猫。
[答案] (1)无尾雌猫与有尾雄猫 (2)子代中无论雄性个体还是雌性个体都表现为有尾性状 子代中雌性个体为有尾猫,雄性个体为无尾猫
eq \a\vs4\al([方法归纳
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