【创新大课堂】高考生物大一轮总复习 第一讲 基因工程用名师优质课件 新人教版选修3.pptVIP

A．①②过程应使用不同的限制性内切酶 B．①②过程都要使用DNA连接酶 C．终止密码子是基因表达载体的重要组成部分 D．若操作成功，可用含红霉素的培养基筛选出该变异株 【解析】　限制性内切酶有特异性，①②过程要切割的DNA序列不同，故应使用不同的限制性内切酶；DNA连接酶的作用是连接被切开的磷酸二酯键，使chl L基因、红霉素抗性基因与质粒结合；基因表达载体由目的基因、启动子、终止子、标记基因组成，终止密码子是mRNA上密码子的一种，表示一次翻译的结束；变异株中chl L基因被重组基因替换，重组基因中有红霉素抗性基因，故可用含红霉素的培养基筛选出该变异株。 【答案】　C 考向二　基因工程的应用 浙江大学农学院喻景权教授课题组研究发现，一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因(如P450基因和红霉素抗性基因)的表达和酶活性都得到提高，在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质，有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作，请回答下列问题。 (1)获得油菜素内酯合成酶基因的方法有　　　　　　　。步骤①用PCR技术扩增基因时用到的耐高温酶通常是指　　　　　　　　　；步骤②用到的酶有_____________ ___________________________________________________。 (2)图中导入重组质粒的方法是　　　　　　　，在导入之前应用一定浓度的　　　　　　　　　　处理受体细菌。 (3)导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可 用　　　　　　　　　　制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入　　　　　　　　　　　　可将含有目的基因的细胞筛选出来。 (4)请你为该课题命名：_______________________________ _______________________________________________________________________________________________________。 【解析】　进行基因工程操作时，首先要获取目的基因，其方法有多种：从cDNA文库中获取、从基因组文库中获取、人工合成目的基因或PCR扩增技术等。在构建基因表达载体的过程中，用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶。图中的受体细胞是细菌，故用转化法导入基因表达载体，导入后，需检验和筛选。从图中可以看出，最终是通过对照实验来检验转基因细菌对土壤中残留农药的分解能力。 【答案】　(1)从cDNA文库中获取、从基因组文库中获取、人工合成目的基因或PCR扩增技术(任选其中两项即可)　TaqDNA聚合酶　限制酶和DNA连接酶 (2)转化法　氯化钙溶液 (3)红霉素抗性基因　红霉素 (4)探究油菜素内酯能否促进土壤中农药的分解 (2013·安徽卷)下图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图。下列叙述正确的是 (　　) A．根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目 B．外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制 C．重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接 D．放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置 【解析】　稀释涂布平板法可以测定活菌数量，但如果菌种之间的距离较小时会有多个活菌种共同形成一个菌落的现象，菌落数只能大约推测出活菌数，不能准确计算活菌数，A错误；外源DNA作为一个完整的基因，自身含有启动子和终止子，B错误；所有DNA分子都是脱氧核糖和磷酸交替连接，是共性，不同的碱基序列才是DNA分子的特异性，DNA分子杂交原理是相应碱基序列的互补配对，C错误；通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆。 因为放射性标记的DNA探针能与相应的DNA杂交，而产生放射自显影，而只有特定的DNA才与探针相结合，所以可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置，D正确。 【答案】　D 解析　(1)限制酶SmaⅠ和限制酶XmaⅠ识别的序列相同，但前者切割形成的是平末端，后者切割形成的是黏性末端，即二者催化反应的结果不同(切割位点不同)。(3)要使外源DNA和质粒连接，二者被限制酶切割后形成的黏性末端应该相同，因此需对质粒进行改造，质粒上有PstⅠ的酶切位点和EcoRⅠ的酶切位点，但无MseⅠ的酶切位点，因此先用EcoRⅠ酶切割质粒，然后用DNA聚合酶等处理质粒，再用DNA连接酶处理质粒，从而形成MseⅠ的酶切位点。 (4)从实验结果可以看出，培养基A中含有4和6的菌落，培养基B中无4和6的菌落，故培养基A含有四环素，培养基B含有青霉素(青霉素和四环素)，