第二章原核微生物II.pptVIP

三、细菌的培养特征 细菌在固体培养基上的培养特征 细菌在明胶培养基中的培养特征 细菌在半固体培养基中的培养特征 细菌在液体培养基中的培养特征 获得微生物菌落方法 稀释平板法 平板划线法 蓝细菌和其它细菌不同，含有叶绿素a、类胡萝卜素、藻胆素及藻胆蛋白体等色素。 蓝细菌的细胞核没有核膜和核仁，细胞壁与细菌相似，由肽聚糖构成，并含有二氨基庚二酸，革兰氏染色阴性，所以将它划分为原核生物中。 蓝细菌常常生长在土壤、岩石上，在树皮上也成片生长，亦有许多种类生长在池塘、湖泊和海洋中。蓝细菌存在共生现象，如蓝细菌与真菌共生形成地衣，与满江红共生形成鱼腥藻等。 * 第二章 原核微生物 II 了解细菌的培养特征 了解细菌的物理化学性质 了解蓝细菌的形态 了解放线菌的繁殖方式 理解放线菌的菌落特征 掌握放线菌的形态和细胞构造 了解立克次氏体、支原体及衣原体的细 胞结构特点 重点：细菌和放线菌的形态和结构及其菌落特征。 难点：细菌细胞壁的结构特征以及与革兰氏染色的关系。 重点及难点 （1）固体培养基上的培养特征：菌落特征 菌落：由单个或少量同种微生物细胞在固体培养基表面或内部繁殖出来的，有一定形态和构造、肉眼可见的子细胞集团。一定条件下形成的菌落特征具有一定的稳定性和专一性，是衡量菌种纯度、辨认和鉴定菌种的重要依据。 菌落特征取决于组成菌落的细胞结构和生长行为，可以从三方面观察 a、表面特征：光滑或粗糙，干燥还是湿润 b、边缘特征：有的圆形，边缘整齐；波状、裂叶状，锯齿状、毛发状、花瓣状等 c、纵剖面的特征：平坦、扁平、隆起、凸起、乳头状等 凝胶状、表面较光滑、湿润、与培养基结合不紧密，易挑取，正反颜色一致。 细菌菌落一般特点 不同形态结构细菌的菌落的特点 球菌菌落：小、圆、隆起、边缘整齐 杆菌菌落：较大、较圆 鞭毛菌菌落：大、扁平、形态不规则或边缘多缺刻 芽孢菌菌落：不透明、粗糙、多褶皱、边缘不规则 荚膜菌菌落：光滑、粘稠、湿润（透明蛋清状） 光滑型菌落 肺炎克雷伯氏菌在DHL培养基上菌落形态 粘膜肺炎球菌在血琼脂平板上菌落 枯草芽孢杆菌菌落形态－粗糙型菌落 稀释平板法 平板划线法 菌落的用途 分离纯化 分类鉴定 细胞计数 选种与育种 菌苔 同一菌体的菌苔特征和菌落特征是相同的，若有异样，则菌体受污染或变异，应分离纯化。 斜面培养基接种线上长成的一片密集的细菌群落。菌苔是由许多菌体繁殖形成（众多菌落连成一片）。 (2)明胶培养基中的培养特征 用穿刺接种法将细菌接种在明胶培养基中培养，能产生明胶水解酶水解明胶，不同的细菌将明胶水解成不同形态的溶菌区，依据这些不同形态，可将细菌进行分类。 （3）半固体培养基的培养特征 半固体培养基：含0.3-0.5%琼脂。穿刺培养，根据细菌的生长状态判断细菌的呼吸类型和鞭毛的有无。 在表面及穿刺线上部生长——好氧 沿穿刺线自下而上生长——兼性厌氧或兼性好氧 只在下部生长——厌氧 扩散生长——有鞭毛，可运动 只沿穿刺线生长——无鞭毛，不运动 （4）液体培养基 细菌在液体培养基中可以自由扩散生长，生长状态随细菌种属不同，可作为分类依据。 四、细菌的物理化学性质 （一）细菌表面电荷和等电点 细菌细胞壁含有由氨基酸组成的蛋白质，因此也有等电点，在pH2-5之间。G+等电点在pH2-3，G-在4-5之间，pH3-4之间为革兰氏染色不稳定性菌。在一般的培养、染色或血清实验等过程中，细菌多处于弱碱性、中性或弱酸性条件，因此细菌表面一般带负电荷，尤其G+带负电更多（磷壁酸中含有大量磷酸基）。 （二）细菌的染色原理及染色方法 1、细菌的染色原理 细菌菌体透明，在显微镜下与背景反差小不易看清菌体的结构，通过染色可增加菌体与背景的反差利于观察。常用染料可分碱性染料（如结晶紫、龙胆紫、甲基紫、孔雀绿、中性红等）和酸性染料（酸性品红、刚果红、曙红等）两大类。细菌一般带负电荷，所以常用带正电的碱性染料染色。少数菌（如分支菌属和诺卡氏菌属的某些菌）用酸性染色。细菌与染料的亲和力与染色液的pH有关。 A 简单染色：常用来观察细菌的形态、大小和排列方式。用一种染液染色菌体。一般菌体被染上染料的颜色。 B 复合染色法：两种染料染色，以区别细菌的革兰氏染色反应或抗酸性反应，或将菌体和某一结构染成不同颜色。 2、常用的染色法有： 3. 革兰氏染色 简单染色法 正染色