动物生化第二章 蛋白质1.ppt

第二章 蛋白质的结构与功能 Chapter 1 Structure and Function of Protein;讲授内容;第一节 蛋白质在生命中的重要作用;蛋白质的概念;酶类 催化体内生化反应 激素蛋白类 调节体内物质代谢，如Ins、IGF-I、GH（Hormone） 运输蛋白类 运输代谢所需小分子、离子以及电子，如血红蛋白 运动蛋白类 使细胞或生物体发生运动，如肌球蛋白和肌动蛋白 防御蛋白类 抵抗入侵，保护机体，如抗体（与细菌、病毒选择性结合）、补体（杀死细菌、病毒）、干扰素（抑制病毒）；凝血酶和血液纤维蛋白原参与血液凝固 受体蛋白类 存在于细胞各个部分，把激素、神经递质信号传递给靶细胞，如膜受体;生长、分化的调节蛋白类 对细胞的生长、分化、基因表达其调节作用。例如：组蛋白、阻遏蛋白、表皮生长因子 营养和贮存类 卵清蛋白、乳中酪蛋白、小麦种子中的醇溶蛋白 结构蛋白类 机体的结构成分，如胶原蛋白、角蛋白、硬蛋白、丝心蛋白、弹性蛋白 毒素蛋白类 极少量即可导致中毒，霍乱毒素、毒蛇的毒素蛋白 膜蛋白类 生物膜的成分，可进行细胞的识别、物质运输、信息传递等; 蛋白质是生命活动所依赖的物质基础。 没有蛋白质就没有生命！;第二节??蛋白质的化学组成;一、蛋白质的元素组成 ;蛋白质的含氮量;二、蛋白质的基本结构单位和其它组分;三、氨基酸 ;甘氨酸 结构式;除甘氨酸外，其余19种氨基酸都具有手性，天然蛋白中的所有氨基酸都是L-型的。 但在某些微生物和植物体中常含有D-型氨基酸 ;;;根据R侧链极性和电荷不同，分四大类 非极性 不带电极性 正电极性 负电极性;非极性氨基酸;Non-polar amino acids;;;;不带电极性;Polar, uncharged amino acids;;;;正电极性;Basic amino acids;;负电极性;Acidic amino acids;;　3.稀有氨基酸;4.非蛋白质氨基酸 ;5.必须氨基酸;6.氨基酸的主要的理化性质 ;氨基酸的两性解离及等电点;氨基酸两性解离示意图;;氨基酸的等电点;从左向右第一个拐点是氨基酸羧基解离50%的状态 第二个拐点是氨基酸的等电点 第三个拐点是氨基酸氨基解离50%的状态;例如丙氨酸有两个可解离基团，a-COOH和a-NH3＋，它们的解离常??pK值分别是2.4（pK1）和9.9（pK2）； 组氨酸有3个可解离基团，即a-COOH、a-NH3＋和侧链基团咪唑基，pK值分别是1.8（pK1）、9.3（pK2）和6.0（pKR）。 每一个pK值都是位于滴定曲线缓冲区的中心，当丙氨酸处于pH2.4的缓冲液时，它的阳离子形式 和它的兼性离子形式 的摩尔浓度相等，同样在pH9.9时，它的兼性离子形式 和它的阴离子形式 的摩尔浓度相等。　　当氨基酸处于某一pH下，其净电荷为零时，该pH即为该氨基酸的等电点（pI）。pI可通过相应的pK值计算出。 ;;;氨基酸的等电点的作用;　7.氨基酸的重要化学反应 ;氨基酸与茚三酮的反应;;氨基酸与2,4-二硝基氟苯反应;;氨基酸与丹磺酰氯的反应;;氨基酸与苯异硫氰酸酯反应;;第三节??蛋白质的化学结构;蛋白质的化学结构;一、蛋白质的氨基酸组成;二、肽键和肽链;;;肽键;氨基酸残基;三、蛋白质的一级结构;;;;;;;多肽链的书写与名称;甲硫脑啡肽命名举例;蛋白质一级结构的测定;氨基酸的组成分析 ;;缺点:;Edman降解 ;过程;;大蛋白被水解成肽段后再测序 ;;;;;蛋白质一级结构的比较可以揭示进化关系 ;;;1955年Sanger等人用酶和化学方法成功测定牛胰岛素全部化学结构 要求：纯度达到97%以上，样品的分子量和氨基酸组成必须事先测出 步骤： 末端测定 二硫键测定 两种裂解法制短肽 纯化短肽 自动蛋白测序仪分析 肽段序列重迭法排序 确定二硫键位置;　　　牛胰岛素的结构;小 结 ;茚三酮与脯氨酸反应生成黄色化合物，与其它氨基酸生成的都是紫色化合物。2,4-二硝基氟苯、丹黄酰氯和苯异硫氰酸酯都能与氨基反应。 蛋白质中的氨基酸残基是通过肽键连接的，残基的序列称之为蛋白质的一级结构。肽和小的蛋白质可以利用液相或固相合成法合成。 可以根据蛋白质溶解度、净电荷、大小以及结合特性上的差异，从生物资源中纯化蛋白质。常用方法包括离子交换层析、凝胶过滤层析、HPLC、SDS、等电聚焦和双向电泳等方法。 多肽的氨基酸序列可以通过Edman降解确定。利用蛋白酶和化学试剂有选择地水解，结合Edman降解可确定大的蛋白质的序列。 比较蛋白质的一级结构可以揭示进化关系，种属的不同常反映在