【创新方案】高中生物 专题5 课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段名师优质课件 新人教版选修1.pptVIP

返回 专题5 课题2 课前预习·巧设计 名师课堂·一点通 重点突破 创新演练·大冲关 知识清单 案例师说 课堂强化 每课一练 了解 PCR技术的基本操作、反应条件 理解 PCR技术的基本原理 PCR技术的原理和基本操作 一、细胞内DNA复制所需要的基本条件 (1)原料： 。 (2)模板：DNA分子 。 (3)酶：打开DNA双链的 、催化合成DNA子链的 。 (4)引物：由于DNA聚合酶合成子链时不能从头开始，而只能从 延伸，因此DNA复制需要引物。 4种脱氧核苷酸 两条母链 解旋酶 DNA聚合酶 3′端 二、PCR技术的条件及原理 1．条件 (1)模板： 。 (2)引物：能分别与 结合的两种引物。 (3)原料： 。 (4)酶： DNA聚合酶。 (5)其他条件：需稳定的 和能自动调控温度的温控设备。 DNA 两条模板链 四种脱氧核苷酸 耐热的 缓冲溶液 2．方向 子链的延伸方向为从 。 3．原理 (1)DNA变性：在 的温度范围内，DNA的 结构解体，双链分开，这个过程称为 。 (2)DNA复性：当温度缓慢 后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成 。 (3)DNA合成：DNA聚合酶从引物 端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的 端向 端延伸。 5′端到3′端 80～100℃ 双螺 旋 变性 降低 双链 3′ 5′ 3′ 三、PCR反应过程和结果 1．过程 PCR一般要经历三十多次循环。 (1)每次循环可以分为 、 和 三步，所需要的温度分别约为 以上、 左右、 左右。 (2)从第二轮循环开始，上一次循环的产物作为 参与反应，并且由 上延伸而成的DNA单链会与 结合，进行DNA的延伸。 变性 复性 延伸 90℃ 50℃ 72℃ 模板 引物Ⅰ 引物Ⅱ 2．结果 DNA聚合酶只能特异地复制处于 之间的DNA序列，使这段 的序列呈指数扩增。 四、DNA含量的测定 1．原理 DNA在 波段有一强烈吸收峰，可利用DNA的这一特点测定DNA含量。 2．计算公式 DNA含量(μg/mL)＝50× ×稀释倍数 两引物 固定长度 260 nm紫外线 260 nm的读数 1．仔细阅读教材P58～62[基础知识]的相关内容，归纳并回答下列问题。 (1)PCR的原理是什么？运用文字与箭头表示出来。 提示：DNA的热变性。 (2)联想DNA复制的知识，讨论并交流：生物体内的DNA复制与PCR技术有哪些异同？填写下表。 (3)观察教材P60～61图5－9，思考PCR反应过程是DNA的两条模板链全长复制吗？若一个DNA分子在PCR中循环n次，可获得的子代DNA分子数是多少？若开始有N0个DNA，则循环n次后获得的子代DNA分子数目是多少？ 提示：①PCR反应过程中的DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列，使该段固定长度的DNA序列呈指数扩增；②2n；③N0·2n。 2．读教材P62[实验操作]和[操作提示]的相关内容，结合你