第8章维生素B6测定.pptVIP

第8章 维生素的测定 8.1 维生素B6的测定 8.2 VB2的测定 8.3 高效液相色谱法测定维生素 维生素：维持人体生理功能所必需的、含量极少但具有重要生理功能的、含量极微的天然有机物质。 维生素种类： 水溶性:VB1、VB2、VB6、VB12、VC 脂溶性：VA、VD、VE、VK 维生素B1。保持循环、消化、神经和肌内正常功能；调整胃肠道的功能；构成脱羧酶的辅酶，参加糖的代谢；能预防脚气病。 维生素B2。又叫核黄素。核典素是体内许多重要辅酶类的组成成分，这些酶能在体内物质代谢过程中传递氢，它还是蛋白质、糖、脂肪酸代谢和能量利用与组成所必需的物质。能促进生长发育，保护眼睛、皮肤的健康。 维生素B5(泛酸)。抗应激、抗寒冷、抗感染、防止某些抗生素的毒性，消除术后腹胀。 维生素B6。在蛋白质代谢中起重要作用。治疗神经衰弱、眩晕、动脉粥样硬化等。 维生素B12（钴胺素）。抗脂肪肝，促进维生素A在肝中的贮存；促进细胞发育成熟和机体代谢；治疗恶性贫血。 维生素B13（乳酸清）。 维生素B15（潘氨酸）。主要用于抗脂肪肝，提高组织的氧气代谢率。有时用来治疗冠心病和慢性酒精中毒。 维生素B17。剧毒。有人认为有控制及预防癌症的作用。 对氨基苯甲酸。在维生素B族中属于最新发现的维生素之一。在人体内可合成。 肌醇。维生素B族中的一种，和胆碱一样是亲脂肪性的维生素。 维生素C。连接骨骼、牙齿、结缔组织结构；对毛细血管壁的各个细胞间有粘合功能；增加抗体，增强抵抗力；促进红细胞成熟。 维生素P。 维生素PP(烟酸)。在细胞生理氧化过程中起传递氢作用，具有防治癞皮病的功效。 维生素M(叶酸)。抗贫血；维护细胞的正常生长和免疫系统的功能。 维生素T。帮助血液的凝固和血小板的形成。 维生素U。治疗溃疡上有重要的作用。 8.1 维生素B6测定 1、适用范围 本标准适用于所添加维生素B6的测定。 测定范围为0.08～3.5μg/mL。 2、 原理用水提取，在pH7条件下，用荧光法测定维生素B6。 维生素B6测定 3、 试剂和溶液 3.1 pH7缓冲液称取29.3023g磷酸氢二钠（GB 1263）和3.8115g柠檬酸，于100mL容量瓶中，用煮沸后冷却的水，溶解并定容至刻度。混匀备用。 3.2 维生素B6标准贮备溶液称取40mg（中国药典参照标准）维生素B6，或复合维生素（中国药典参照标准）B640mg， B1100mg，B250mg（精确至0.0001g）于100mL容量瓶中，加水溶解定容至刻度，此液1mL含400μg的维生素B6。 3.3 维生素B6标准工作溶液 吸取（3.2）贮备液1mL于100mL容量瓶中加水稀释至刻度，混匀，此液1mL含4μg的维生素B6。 维生素B6测定 4 仪器设备 4.1 荧光分光光度计； 4.2 分析天平：感量0.0001g。 4.3 实验室用器皿 容量瓶 1000mL，100mL，50mL，25mL。 刻度移液管 10mL，5mL，1mL。 维生素B6测定 5 、分析步骤 5.1 试样的选取和制备 选取有代表性的试样，粉碎通过0.28mm孔筛，用四分法缩减至100g，密封保存，以防试样维生素B6变化或变质。 5.2 测定步骤 5.2.1 维生素B6的提取 称取试样0.5～2g，（精确至0.0001g）于100mL容量瓶中，加水溶解后，定容至刻度，振荡1～2min，静置待沉清，或离心（400r/min）10min。 维生素B6测定 5.2.2 试样的测定 移取试样的上清液1mL（≤40μgVB6）于25mL容量瓶中，加入（3.1）pH7缓冲液至刻度，混匀，用1cm石英比色杯，置入荧光分光光度计内，于激发波长326nm、发射波长395nm测定其荧光强度。 同时做空白试验。 维生素B6测定 5.2.3 工作曲线的绘制 取0.00，0.50，1.00，1.50，2.00，2.50mL维生素B6标准工作液（3.3）分别于25mL容量瓶中，加入pH7缓冲液（3.1）至刻度，混匀，用1cm石英比色杯，置入荧光分光光度计内，于激发波长326nm、发射波长395nm测定其荧光强度，以荧光强度为纵坐标，维生素B6量为横坐标，绘制工作曲线。 维生素B6测定 6 分析结果计算和表述 维生素B6的含量（mg/kg）按下式计算： VB6（mg/kg）＝M×D/W×（1000/1000）＝M×D/W 式中：M──工作曲线上查得维生素B6含量，μg/mL； W──试样的质量，g； D──试样的总体积，mL。 维生素B6测定 7 、允许差 7.1 每个试样称取两份平行测定，取算术平均值为测定结果并保留两位小数。 7.2 维生素B6含量