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活动 1. 描述基因工程的操作步骤。 目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 一、蛋白质工程崛起的缘由 1、基因工程的不足 (1)基因工程的实质:将一种生物的 转移到另一种生物体内,使后者产生本不能产生的 ,进而表现出新的 。 (2)基因工程的不足:在原则上只能生产自然界已存在的 。 2、天然蛋白质的不足 天然蛋白质是生物在长期 过程中形成的,它们的 符合特定物种 的需要,却不一定完全符合人类生产和生活的需要。 基因 蛋白质 性状 蛋白质 进化 结构和功能 生存 一、蛋白质工程崛起的缘由 满足人类生产和生活的需要 例如: 改造 干扰素(半胱氨酸) 体外很难保存 干扰素(丝氨酸) 体外可以保存半年 玉米中赖氨酸含量比较低 天冬氨酸激酶 (352位的苏氨酸) 二氢吡啶二羧酸合成酶(104位的天冬酰胺) 天冬氨酸激酶 (异亮氨酸) 二氢吡啶二羧酸合成酶(异亮氨酸) 玉米中赖氨酸含量可提高数倍 改造 改造 二、蛋白质工程的基本原理 对天然蛋白质进行改造,你认为应该直接对蛋白质分子进行操作,还是通过对基因的操作来实现? 1、目标: 根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计。 2.对天然蛋白质进行改造,你认为应该直接对蛋白质分子进行操作,还是通过对基因的操作来实现? 答:毫无疑问应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改造,主要原因如下: (1)任何一种天然蛋白质都是由基因编码的,改造了基因即对蛋白质进行了改造,而且改造过的蛋白质可以遗传下去。如果对蛋白质直接改造,即使改造成功,被改造过的蛋白质分子还是无法遗传的。 (2)对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作,难度要小得多。 旁栏思考题 以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质,以满足人类对生产和生活的需求。 前提: 原理: 目的: 了解蛋白质的结构和功能 改造基因(基因修饰或基因合成) 定向改造或制造蛋白质 一、蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指通过物理化学与生物化学等技术了解蛋白质的结构和功能,并借助计算机辅助设计、基因定点诱变和重组DNA技术改造基因,以定向改造天然蛋白质,甚至创造自然界不存在的蛋白质的技术。 氨基酸序列多肽链 蛋白质三维结构 预期功能 基因 DNA DNA合成 分子设计 折叠 翻译 二、蛋白质工程的基本原理 转录 mRNA 生物功能 表现 对蛋白质进行改造 大改 中改 小改 设计、制造出自然界不存在的 全新蛋白质 替代某一个肽段或一个 特定的结构域 改造某个活性单位的一个或几 个氨基酸残基(定点诱变技术) 核心技术 思考:基因定点诱变技术与基因突变的比较 比较 基因定点诱变 基因突变 相同点 发生的过程 结果 不同点 场所 手段 方向 DNA复制过程中 产生新基因,从而产生新性状 生物体外 生物体内 定向改造 不定向性 PCR技术 物理化学方法 活动 比较基因工程和蛋白质工程 基因工程 蛋白质工程 相同点 都要改造基因,都属于分子水平 产生新的 基因型,无新基因 基因(型) 产生的蛋白质 原有的 新的 联系 蛋白质工程以基因工程为基础, 是基因工程的应用和延伸 异亮氨酸 苏氨酸 蛋白质工程的应用 天门冬酰胺 天门冬酰胺 酵母菌 丙糖磷酸异构酶 热稳定性提高50% 工业生产上 1.? 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是( ) A. 氨基酸结构 B. 蛋白质空间结构 C. 肽链结构 D. 基因结构 练习: 1.? 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是( ) A. 氨基酸结构 B. 蛋白质空间结构 C. 肽链结构 D. 基因结构 练习: D 2. 下列关于蛋白质工程的说法错误的是( ) A. 蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构,使之更加符合人类的需要 B. 蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变分子的结构 C. 蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子 D. 蛋白质工程与基因工程密不可分,又被称为第二代基因工程 2. 下列关于蛋白质工程的说法错误的是( ) A. 蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构,使之更加符合人类的需要 B. 蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行
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