S1实验一熟悉组织培养实验室理论部分.docVIP

实验一 熟悉组织培养实验室（理论） 一、植物组织培养概念 是指将植物的离体器官（如根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（如花药、胚珠、形成层、皮层、胚乳等）、细胞（如体细胞、生殖细胞花粉等）以及去除细胞壁的原生质体，放在离体无菌条件下，在人工控制的环境条件下，培养在人工配制的培养基上对其进行克隆，使其生长、分化并成长为完整植株的过程。由于是在离体条件下进行的，故又可称为离体培养。 二、植物组织培养的特点 1、植物基础学科研究的良好系统 与植物学、细胞生物学、生物化学、植物生理学、微生物学、植物遗传育种、生物制药等课程密切相关，为各学科的研究提供了基础知识、理想的离体研究条件。 2、生物技术的基础 21世纪是生命科学的世纪，而生命科学的巨大作用是要依靠新的技术方法的推动才得以实现。新技术：生物技术；核心是植物基因工程，基础是植物组织培养。 3、经济高效、管理方便、利于自动化 场所一定 温度、湿度、光照等条件一定 试验和生产均微型化和精密化 便于实现流水作业 利于生产管理 避免微生物的干扰与破坏 4、技术含量高、试验误差小、人工控制能力强 外界影响小 条件基本均一 全年时间都可试验与生产 处理间误差小 5、生长周期短、生长速度快、试验重复性好 人工控制，缩短大量时间 工厂化大生产 苗木优质，技术先进 较少受外界条件影响，试验重复性好 6、实验材料经济、来源单一 实验材料的遗传性是否一致，决定实验是否成功 来源单一，遗传背景一致 取材少，培养效果好 繁殖快 7、缺点 设备复杂、投入资金多、电能消耗大 对人员技术要求高 对试验场所要求高 三、组织培养方法 根据培养方式不同，可以分为固体培养和液体培养；根据培养物量的多少，可以分为大量培养和微量培养；根据培养过程中是否需要光，可以分为光培养和暗培养；根据培养方法的不同，可以分为平板培养、微室培养、悬浮培养和单细胞培养等；根据培养器官的不同，可以分为花药培养、胚珠培养、根培养和茎尖培养等。总之，植物组织培养的分类方法很多，但无论哪种方法均为在无菌条件下的离体培养。 四、研究内容 研究离体培养条件下，细胞或器官所需要营养条件和环境条件；细胞或组织器官的形态发生规律；植物材料的快速大量繁殖；细胞融合方法和机理；再生个体的遗传和变异；种质资源的离体保存机理和方法；动物克隆技术原理等；改良生物品种，创造新的生物种类，为人类造福。 五、组织培养的生理依据 依据是细胞全能性（cell totipotengcy）学说。 其内容为：植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力。 六、组织培养的应用前景与趋势 随着组织培养技术的日益完善，其应用也越来越广泛。主要应用领域有以下几个方面： 1、植物的快速繁殖 我国离体繁殖技术的开发应用起步于20世纪80年代初。 上海的康乃馨（上海园林科研所） 北京的切花菊（原北京农业大学园艺系组织与细胞培养室） 广州的香蕉 河北的杨树 2、脱除病毒 改善作物的生长状态 生产无病毒苗木 提高产品质量与产量 国际热带农业研究中心（IITA）、国际马铃薯研究中心（CIP）、亚洲蔬菜研究中心（AYRDC）均是以生产无病毒苗木为中心课题的。 3、培育新品种 生产符合人们需要的特性的新品种 如：杂交水稻（袁隆平）、手指玫瑰（韩国，2006） 4、植物种质资源的保存 种质资源目前受到严重的破坏 人类需求的多样化 5、人工种子的研究 1984年，罗士韦向我国介绍人工种子 1987年，人工种子纳入我国国家高技术发展计划（863计划） 如：胡萝卜、苜蓿、莴苣、芹菜、小麦、水稻、西洋参、云杉、百合等30余种。 6、次生代谢产物的生产 在医药、食品行业中应用较多 如：鸭脚树种子愈伤组织中提取利血平用于降血压 人参根愈伤组织中提取强心配糖体治疗心脏病 红豆杉细胞中提取紫杉醇用于抗癌药物 七、植物材料的特点 在无菌条件下培养的植物离体材料称为外植体。即第一次接种所用的植物组织、器官等一切材料。 包括顶芽、腋芽、茎段、茎尖、形成层、皮层、花序、花瓣、胚珠、叶片、叶柄、花粉、根、表皮组织、胚、胚轴、子叶、胚根、块茎、原生质体等。 1、植物幼年期与成年期比较 幼年期植物： 生长快、呼吸强、核酸和蛋白质代谢快 成年期植物： 代谢和生理活动较慢、光合速率和呼吸速率下降 基因可能会发生变异，细胞器DN