第四章酶与催化反应.ppt

研究各种因素对酶促反应速率的影响，并加以定量的阐述。 底物浓度 酶浓度 温度 PH 激活剂 抑制剂 pH对酶活性的影响主要有下列几个方面： （1）极强的酸或碱可以使酶的空间结构破坏，引起酶变性； （2）影响酶活性中心催化基团的解离状态，使底物不能分解成产物； （3）影响酶活性中心结合基团的解离状态，使底物不能与它结合； （4）影响底物和辅酶功能基团的解离状态。 酶催化活性最高时溶液的pH值就称为酶的最适pH。 人体内大多数酶的最适pH在6.5～8.0之间。 酶的最适pH不是酶的特征性常数。 六、激活剂对酶促反应速率的影响 酶的激活剂（activator） 使酶从无活性变为有活性或使酶活性增加的物质 必需激活剂（essential activator） 为酶促反应所必需，如缺乏则测不到酶的活性 Mg2+为己糖激酶的必需激活剂 非必需激活剂（non-essential activator） 可以提高酶的催化活性，但不是必需的 Cl-对唾液淀粉酶的激活作用 在酶促反应中，凡能与酶结合而使酶的催化活性下降或消失，但又不引起酶变性的物质称为酶的抑制剂（inhibitor，I）。 七、抑制剂对酶活性抑制作用 抑制剂可与酶活性中心内或活性中心外的必需基团结合，从而抑制酶的活性。 根据抑制剂与酶是否共价结合及抑制效果的不同，将抑制剂对酶的抑制作用分为可逆性抑制剂（reversible inhibitor）和不可性逆抑制剂（irreversible inhibitor）。 抑制剂与酶分子的必需基团共价结合引起酶活性的抑制，且不能采用透析等物理方法使酶活性恢复的抑制作用就是不可逆抑制作用。 （一）不可逆抑制作用 不可逆性抑制作用的抑制剂 ： 基团特异性抑制剂（group-specific inhibitor） 底物类似物（substrate analog） 自杀性抑制剂（suicide inhibitor） 1．基团特异性抑制剂与酶分子中特异的基团共价结合 一些酶活性中心的催化基团是丝氨酸残基上的羟基，这些酶称为羟基酶。 如胆碱酯酶和丝氨酸蛋白酶 有机磷化合物 羟基酶 失活的酶 酸 C H 3 CH N + HON RO P RO O O E + N RO P RO O O CH C H 3 N + + E OH 解磷定 失活的酶 有机磷-解磷定复合物 活化的酶 半胱氨酸残基上的巯基是许多酶的必需基团。低浓度的重金属离子(Hg2+、Ag2+、Pb2+等)及As3+等可与巯基酶分子中的巯基结合，使酶失活。 2．底物类似物可共价地修饰酶的活性中心 与基团特异性抑制剂不同，底物类似物与底物的结构相似，可特异地与酶的活性中心共价结合，不可逆地抑制酶的活性。此类抑制剂可作为亲和标记物，用来定性酶活性中心的功能基团。 酶的自杀性抑制剂可以作为酶的底物与酶活性中心相结合，生成酶-底物复合物，并接受酶的催化作用。然而，经催化后的中间产物不游离出产物，而是转化为酶的抑制剂，进一步与酶活性中心共价结合，对酶产生抑制作用。 E + S ES ??? E·I ??? E-I 3．自杀性抑制剂是经过修饰的酶的底物 + 酶-底物复合物 无活性酶中 被修饰的FAD ? N，N-二甲基丙炔酰胺 自杀性抑制剂N,N-二甲基丙炔酰胺在被单胺氧化酶氧化后，由于填加1个质子，使之与酶的辅基FAD结合生成稳定的烷化物，从而酶被抑制。 单胺氧化酶通过其辅基FAD氧化N,N-二甲基丙炔酰胺(N,N-dimethylpropargyl amine)： （二）可逆抑制作用： 抑制剂以非共价键与酶分子可逆性结合造成酶活性的抑制，且可采用透析等简单方法去除抑制剂而使酶活性完全恢复的抑制作用就是可逆抑制作用。 可逆抑制作用包括竞争性、反竞争性、和非竞争性抑制几种类型。 1.竞争性抑制（competitive inhibi-tion)： 抑制剂与底物竞争与酶的同一活性中心结合，从而干扰了酶与底物的结合，使酶的催化活性降低，称为竞争性抑制作用。 由于抑制剂与酶的结合是可逆的，抑制程度则取决于： 抑制剂与酶的相对亲和力 与底物浓度的相对比例。 竞争性抑制的速度方程与图形特征 抑制剂对反应速度的影响 竞争性抑制 竞争性抑制的特点： ⑴抑制剂与酶的底物结构相似，往往是酶的底物类似物或反应产物； ⑵ 抑制剂与酶的结合部位与底物与酶的结合部位相同，抑制剂与底物竞争结合酶的活性