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细胞融合技术 高中生物选修三 第二章 细胞工程 + 细胞融合技术 一、定义 采用自发或人工的方法使两个或多个细胞融合为一个细胞的技术 二、原理 细胞具有流动性 提问: 1.促进细胞融合都有哪些方法? 2.各种方法包括哪些内容?各有什么优缺点? 三、促进细胞融合的方法 生物法 化学法 物理法 1.生物法 如仙台病毒、疱疹病毒、天花病毒、腮腺炎病毒、新城鸡瘟病毒等 优点: 效率高,能在鸡胚中大量繁殖 缺点: 仙台病毒不稳定,在保存过程中融合活性会降低,制备过程烦琐,且仅适用于动物细胞融合 2.化学法 如聚乙二醇、溶血卵磷脂、高浓度钙离子、硝酸钠等 优点 聚乙二醇促融合频率高(如是仙台病毒的几百倍) 缺点 有一定毒性,对某些细胞不适应 3.物理法 如离心、震荡、电刺激等 优点 诱导细胞融合的频率高,对细胞无毒害作用,操作简便,可重复性好 存在生殖隔离 这幅番茄—马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗?为什么? 不 能 四、体细胞杂交技术 1、概念: 将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 2、原理: 3、过程 A B 去壁 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂种细胞 再生新壁 脱分化 再分化 杂种植株 A B 去壁 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂种细胞 再生新壁 脱分化 再分化 (1)去壁: 酶解法(纤维素酶和果胶酶处理) 方法: A B 去壁 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂种细胞 再生新壁 脱分化 再分化 ①原理: 细胞膜的流动性 (2)原生质体融合: A B 去壁 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂种细胞 再生新壁 脱分化 再分化 ②方法: 物理法:离心、振动、电刺激 化学法:聚乙二醇(PEG) A B 去壁 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂种细胞 再生新壁 脱分化 再分化 ③融合细胞的种类: AA、BB、AB 选择性培养基 筛选 A B 去壁 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂种细胞 再生新壁 脱分化 再分化 ④融合完成的标志: 杂种细胞形成新细胞壁 A B 去壁 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂种细胞 再生新壁 脱分化 再分化 (3)植物组织培养: 白菜 甘蓝 白菜-甘蓝 “白菜-甘蓝”同普通白菜相比,具有生长期短、耐热性强和易于贮藏等优点。 为什么“番茄—马铃薯” 杂种植株没有如科学家所想像的那样,地上长番茄、地下结马铃薯? 原因:生物基因的表达不是孤立的,而是相互调控、相互影响的。 马铃薯—番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质,但这些遗传物质的表达受到相互干扰,不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达。 3、优点: 目前还不能让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状。 克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩大了用于杂交的亲本组合的范围。 4.未能解决的问题: 5、植物体细胞杂交技术: 无性繁殖 染色体变异 繁殖方式: 变异类型: 不遵循孟德尔遗传定律 例.完成下列过程 ①用 酶和 酶去除植物细胞壁,获得具有生命活力的 。 ②物理法: 、 、 等 ③化学法:用 作为诱导剂。 ④再生细胞壁,得到 。 ⑤诱导 形成 组织。 ⑥通过 最终得到杂种植株。 其中①②③属于 ,④⑤用到 技术。 纤维素 果胶 原生质体 离心 震动 电刺激 聚乙二醇 杂种细胞 愈伤 植物组织培养技术 杂种细胞 诱导细胞融合 植物组织培养 例:2013年全国理综 甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。回答下列问题: (1)为了培养该新型药用植物,可取甲和乙的叶片,先用 酶和 酶去除细胞壁,获得具有活力的 ,再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞
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