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- 2019-09-25 发布于江苏
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抗氧化酶活性测定(APX、GPX、SOD、CAT、Pro)参考《在同一提取系统中同时测定5种抗氧化酶活性》
注意事项:在本提取系统中同时测定抗坏血酸专一性过氧化物酶(APX)、愈创木酚过氧化物酶(GPX)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、可溶性蛋白共5个指标;所有操作过程必须在冰浴中完成,降低保护酶活性的损失;称量药品时可稍稍过量。
提取液及反应准备液配置:以下溶液1-7d内可用,4℃保存。
1mol/L HCl(100ml):8.333ml浓HCl定容至100ml。
750mM(750mmol/L) H2O2(100ml):7.570mL 30%H2O2定容至100ml。
500mM H2O2(100ml):5.0464mL 30%H2O2定容至100ml。
10mM H2O2(100ml):2mL 500mM H2O2定容至100ml。
(1)配置500ml提取液所需试剂药品如下:
药品
用量
Tris
3.0285g
HCl(1mol/L)
22.5ml
甘油
100ml
EDTA(乙二胺四乙酸二钠)
0.18612g
AsA(抗坏血酸)
0.08806g
DTT(二硫苏糖醇)
0.07713g
GSH(谷胱甘肽)
0.15366g
MgCl2
0.50825g
蒸馏水溶解后(终体积为450ml左右),0.1mM的HCl和NaOH调节pH至7.0,然后定容至
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