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- 2019-09-25 发布于湖北
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一、基础知识: (一)蛋白质提取和分离原理 (二)蛋白质提取和分离的方法 1、凝胶色谱法:又称分配色谱法 2、电泳法 (三)缓冲溶液 蛋白质提取与分离的依据-- 蛋白质的物理化学性质差异: 1.分子的形状、大小 2.电荷性质和多少 3.溶解度 4.吸附性质 5.对其他分子亲和力 3)常用电泳方法 琼脂糖凝胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 加入带负电荷多的SDS,形成“蛋白质-SDS复合物”,使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。 纯度鉴定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 判断纯化的蛋白质是否达到要求,需进行蛋白质纯度鉴定,使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 * * 人教版选修1 专题5 DNA和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取和分离 二、实验操作--实验步骤 血液组成成分 1.洗 涤 红 细 胞 2.释放血红蛋白 3.分离血红蛋白 4.透析血红蛋白 样品处理 和粗分离 纯 化 纯度鉴定 1.凝胶色谱法 1)原理: 2)材料:凝胶 大分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快; 小分子穿过多孔凝胶颗粒的内部,路程长,流动慢。 凝胶是微小的多孔性球体,如葡聚糖或琼脂糖
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