P450的一篇英文文章翻译.docVIP

人参皂苷合成途径中催化达玛烯二醇合成原人参二醇的细胞色素P450酶——CYP716A47 摘要：人参是一种有名的中药，且在它的根中含有药理活性成分——人参皂苷。人参皂苷是四环三萜皂苷的一种，被认为是由达玛烯二醇经过细胞色素P450羟化和糖基转移酶糖基化后形成的。然而，还没有编码羟基化和糖基化的基因被鉴定出来。本文，我们鉴定了一个原人参二醇合酶，该酶为细胞色素酶，通过对达玛烯二醇的碳12位进行羟化作用形成原人参二醇。从由茉莉酸甲酯诱导后的人参不定根的EST序列中筛选到9个假定的细胞色素序列。因为CYP716A47不止在茉莉酸甲酯诱导后表达量提高，且在过表达角鲨烯合酶，皂苷高产的转基因人参中表达量也很高，因此被认为是原人参二醇合酶。体外实验证明CYP716A47催化达玛烯二醇合成原人参二醇。在酿酒酵母WAT21中异源表达CYP716A47，可催化达玛烯二醇合成原人参二醇。另外，在不添加达玛烯二醇的情况下，在酵母中共表达，达玛烯二醇合酶基因和CYP716A47基因，能生成原人参二醇。由达玛烯二醇形成的原人参二醇结构式通过液相色谱联合大气压化学电离质谱进行分析鉴定。因此，CYP716A47是一个催化达玛烯二醇合成原人参二醇的达玛烯C12羟化酶。 关键词：CYP716A47；细胞色素 P450；达玛烯二醇；人参皂苷；原人参二醇 1、前言 三萜皂苷是高等植物中异戊二烯类的次生代谢产物。在不同种