大肠杆菌SPA的提取表达及鉴定.docVIP

PAGE PAGE 1 SPA的提取、表达及鉴定 班级： 08级生物技术试验班 学号： 姓名： 指导老师： 时间:2010年9月13日～11月19日 目 录 §1 前言（背景介绍） 3 1.1 SPA介绍 3 1.2 实验原理/ 5 §2 材料与方法 7 2.1实验材料 7 2.2实验方法 8 2.2.1试剂的配制、灭菌及无菌接种 8 2.2.2 蛋白的提取 9 2.2.3 SDS检测表达的蛋白质 10 2.2.4 western blotting 11 §3 实验结果与讨论 12 3.1结果汇总 12 3.2结果讨论 13 3.3注意事项 14 参考文献 15 §1 前 言 1.1 SPA介绍 1.1.1 SPA简介 金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A、简称SPA)是细胞壁抗原的主要成分，几乎90%以上的菌株均含有这种成分，但不同的菌株含量差别十分悬殊。SPA占整个细胞壁蛋白成分的6.7%，通过胞壁肽聚糖以共价键与之结合。其它葡萄球菌如表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌不含SPA。 1.1.2 SPA的理化性质 SPA是一种蛋白质,由亮、缬、脯、丙、苏、甘、丝、谷丙、天门冬及赖氨酸等十种氨基酸组成。由于不含有胱氨酸及半胱氨酸，所以