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[做一题] [例2] (2012·海淀质检)1952年“噬菌体小组”的赫尔希和蔡斯研究了噬菌体的蛋白质和DNA在侵染过程中的功能,请回答下列有关问题: (1) 他们指出“噬菌体在分子生物学的地位就相当于氢原子 在玻尔量子力学模型中的地位”。这句话指出了噬菌体 作为实验材料具有_______________________的特点。 (2)通过________________________________________的方 法分别获得被32P和35S标记的噬菌体,用标记的噬菌体侵染细菌,从而追踪在侵染过程中________________________________________变化。 (3) 侵染一段时间后,用搅拌器搅拌, 然后离心得到上清液和沉淀物, 检测上清液中的放射性,得到如 图所示的实验结果。搅拌的目的 是________________________________,所以搅拌时 间少于1 min时,上清液中的放射性________。实验结 果表明当搅拌时间足够长时,上清液中的35S和32P分别 占初始标记噬菌体放射性的80%和30%,证明 ________________________。图中“被侵染细菌”的存 活率曲线基本保持在100%,本组数据的意义是作为对 照组,以证明________________________,否则细胞 外________放射性会增高。 (4) 本实验证明病毒传递和复制遗传特性中________起着 作用。 [解析] 本题主要考查噬菌体侵染大肠杆菌的实验。(1)噬菌体作为实验材料,是因为其结构简单,只含有蛋白质和DNA。(2)噬菌体是病毒,离开活体细胞不能繁殖,所以要标记噬菌体,首先应用含32P和35S的培养基培养大肠杆菌,再让噬菌体侵染标记后的大肠杆菌,即可达到标记噬菌体的目的,进而追踪在侵染过程中蛋白质和DNA的位置变化。(3)噬菌体侵染大肠杆菌的时间要适宜,时间过长,子代噬菌体从大肠杆菌体内释放出来,会使细胞外32P含量 增高。图中被侵染细菌的存活率始终保持在100%,说明细菌没有裂解,没有子代噬菌体释放出来。细胞外的35S含量只有80%,原因是在搅拌时侵染细菌的噬菌体外壳没有全部分离;细胞外的32P含量有30%,原因时有部分标记的噬菌体还没有侵染细菌。该实验证明DNA是噬菌体的遗传物质。 [答案] (1)结构简单,只含有蛋白质和DNA(核酸) (2)用含32P和35S的培养基分别培养大肠杆菌,再用噬菌体分别侵染被32P和35S标记的大肠杆菌 DNA和蛋白质的位置 (3)使吸附在细菌上的噬菌体与细菌分离 较低 DNA进入细菌,蛋白质没有进入细菌 细菌没有裂解,没有子代噬菌体释放出来 32P (4)DNA [链一串] 1.实验结果中放射性分布的分析 (1)用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌,上清液中含有放射 性的原因。 ①保温时间过短,有一部分噬菌体未侵入到大肠杆菌细胞内,经离心后分布于上清液中,使上清液出现放射性。 ②从噬菌体和大肠杆菌混合培养到用离心机分离,这一 段时间保温时间过长,噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放 子代,经离心后分布于上清液中,也会使上清液的放射 性升高。 (2) 用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌,理论上沉淀物中不 含放射性,但可能由于搅拌不充分,有少量35S的噬菌 体外壳仍吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中,使 沉淀物中出现少量的放射性。 2.与肺炎双球菌的体外转化实验的比较 肺炎双球菌转化实验 噬菌体侵染细菌实验 不同点 方法不同 直接分离:分离S型细菌的DNA、多糖、蛋白质等,分别与R型菌混合培养 同位素标记:分别用32P和35S标记DNA和蛋白质 结论不同 证明DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质 证明DNA是遗传物质,不能证明蛋白质不是遗传物质(因蛋白质没有进入细菌体内) 肺炎双球菌转化实验 噬菌体侵染细菌实验 相同点 ①均使DNA和蛋白质分开,单独处理,观察它们各自的作用 ②都遵循了对照原则 ③都能证明DNA是遗传物质,但都不能证明DNA是主要的遗传物质 [通一类] 3.(2012·东城质检)如果用15N、32P、35S共同标记噬菌体后, 让其侵染大肠杆菌,在产生的子代噬菌体中,能够找到的标记元素为 ( ) A.在外壳中找到15N和35S B.在DNA中找到15N和32P C.在外壳中找到15N D.在DNA中找到15N、32P和35S 解析:用15N、32P、35S共同标记噬菌体,15N标记了噬菌体的DNA和蛋白质外壳,32P标记了噬菌体的核酸,35S标记了噬菌体的蛋白质外壳,噬菌体侵染细菌过程中蛋白质外壳留在细菌外面,核酸进入细菌内部,在细菌中以噬菌体DNA为模板,利用细菌的原料合成子代噬
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