3-3蛋白质一级结构.pdf

蛋白质的一级结构 介绍蛋白质的一级结构及一级测定研究思维 牛胰核糖核酸酶 细 胞 色 素 胰岛素 C  英国学者Sanger1953年报告胰 岛素氨基酸序列，现已测定了 100000个不同蛋白质的氨基酸 序列，有相当一部分是采用 Sanger发明的方法  但目前大多数蛋白质氨基酸序 列是通过基因的核苷酸序列推 导出的  “我喜欢做别人没有想到的 事，而不是和别人竞争谁先 完成预定的计划；我偏爱把 精力集中在实验研究上，而 不是取得最终结果” 1、介绍几种方法技术 利用介绍的现有几种技术或方法，设计测定胰 岛素分子氨基酸排列次序的实验方案，并说明 每一步的目的、依据的原理、可能的结果。 生物分子的分离纯化技术获得单一物质样品 2016/9/22 食品科学与工程学院 5 1 纯化蛋白质样品（纯度97%以上）； 2 测定蛋白质的分子量； 蛋白质变性（高级结构破坏）方法 由多条多肽链组成的蛋白质分子，必须先 进行拆 分，非共价相互作用、共价键作用--二硫桥交联 蛋 白 质 一 级 结 构 的 测 定 蛋白质变性（高级结构破坏）方法 几条多肽链借助非共价键连接在一起，常为寡聚蛋白质，如， 血红蛋白为四聚体，烯醇化酶为二聚体；可用8mol/L尿素或 6mol/L盐酸胍处理，即可分开多肽链. 蛋 几条多肽链通过二硫键交联在一起。可在8 mol/L尿素或 白 6mol/L盐酸胍存在下，应用过甲酸氧化法或巯基还原法拆分 质 多肽链间的二硫键，然后用烷基化试剂保护生成的巯基，以 一 防止它重新被氧化 级 结 构 的 测 定 巯基保护方法 巯 基 O CH OCCl 2 （ -OOC CHCH2 SOCCH2 - + S NH3 O CH Cl 2 H -OOC CHCH2 SH -OOC CHCH2 SCH2 + + O NH3 ） NH3