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变性梯度凝胶电泳 变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链,称之为变性。核酸50%发生变性时的温度称为熔解温度(Tm)。Tm值主要取决于DNA分子中GC含量的多少。DGGE将凝胶设置在双重变性条件下:温度50~60 ℃ 详细 实验方法 变性梯度凝胶电泳(DGGE) 实验材料 DNA样品 试剂、试剂盒 尿素 去离子甲酰胺 丙烯酰胺 甲叉双丙烯酰胺 琼脂糖? 仪器、耗材 PCR扩增仪 变性梯度凝胶电泳仪 凝胶成像及分析系统 紫外透射仪 高速离心机 电泳仪 电泳槽 微量加样器 Tip头 Tip头盒 Eppendorf管 Eppendorf管架 一、实验原理 变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链,称之为变性。核酸50%发生变性时的温度称为熔解温度(Tm)。Tm值主要取决于DNA分子中GC含量的多少。DGGE将凝胶设置在双重变性条件下:温度50~60 ℃ 为了提高DGGE的突变检出率,可以人为地加入一个高熔点区——GC夹。GC夹(GC clamp)就是在一侧引物的5′端加上一个30~40bp的GC结构,这样在PCR产物

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