真核基因表达调.ppt

* * Xic：X染色体 inaction center * 转录水平的调控是基因表达调控中最重要的环节 转录水平的调控主要是通过顺式调控元件与反式作用因子相互作用来实现实现的 * 启动子和增强子的差异并不明显,增强子可看成含有密集的启动子元件,能在远离起始点处实施功能的启动子部分. 关于增强子与启动子不同的可能功能,由三种提议,但是实验证明4.更为可能.参见下页图. * 增强效应与其位置和取向无关 没有5’-或3’-方向性；增强子的位置可在基因5’-上游、基因内或3’ 下游序列中；增强子可远离转录起始点； 许多增强子还受外部信号的调控，如金属硫蛋白基因启动区上游 所带的增强子，就可以对环境中的锌、镉浓度做出反应 * 蛋白质桥可使现行分子两极端(转录效率不佳)的启动子和增强子互作,至少使之互相靠近(提高转录效率). 套环则用于两环状分子上的启动子和增强子.例如,细菌的增强子有NtrC结合位点,它与启动子上的RNA聚合酶互作.当使两者通过套环互作时,其效率与两者同在一个环状分子上时相差无几.但不能启动.进一步说明增加增强子结合蛋白与启动子接触的重要性. * 热休克反应元件，heat shock respons element，热激因子HSF 糖皮质激素反应元件，glucocorticoid response element 金属反应元件，metal response element * BLE:本底水平的调控元件，作用类似于增强子 * 研究较清楚的转录因子有识别TATA区的TFⅡD，识别CAAT区的CTF，识别GC区的SP1，识别热激蛋白启动区的HSF 结构域(domain)：是指蛋白质中可以具有独立的超二级结构的部分。通常由一个基因外显子编码，并可具有特定的功能。 基序(motif)：一般指构成任何一种特征序列的基本结构．作为结构域中的亚单元，其功能是体现结构域的多种生物学作用． * Glucocorticoid receptor：糖皮质激素受体 Dissociation解离, dimerization二聚化 Steroid：类固醇 * Interferon-γ：干扰素 * 根据基因沉默发生的时期, * 不同的启动子或不同的poly(A)加尾位点的选择，也可看作选择性剪接 * 内含子和外显子的划分不是绝对的. 高等真核生物基因数量多而分布范围大,同时也通过不同的方式从同一基因生产多种蛋白.后一类基因的数量估计占数个百分点. 5、RNA沉默的功能 PTGS在生物界中是一种普 遍现象，是真核生物长期进化过程中形成的一种抵御病毒、转座子等外来核酸的入侵、识别并抑制外源基因的表达，维持生物基因组稳定性的重要防御机制 。 6、RNA沉默应用Applications of RNA silencing （1）基因功能分析 （2）培育抗病毒作物 （3）作物品质遗传改良 How to Silencing a Gene hairpin RNA transgene AAAAAAA- complementary regions Promoter Terminator mRNA Hairpin RNA 二、MiRNA (MicroRNA)与基因表达调控 （一）特点： 1、miRNAs是一种21－25nt长的小分子RNA 2、具有高度的保守性、时序性和组织特异性 3、主要作用于靶标基因3′-UTR区 ，阻遏翻译 （二）功能： 主要在发育过程中起作用，调节内源基因表达 （三）MiRNA的生成及作用机制 MiRNA作用模式 1、与靶标基因3′-UTR区不完全互补结合，阻遏翻译而不影响mRNA的稳定性（这种miRNA是目前发现最多的种类，如线虫lin-4） 2、与靶标基因完全互补结合，作用方式和功能与siRNA非常类似，最后切割靶mRNA，这说明某些miRNA和siRNA一样参与了机体内一些特异性mRNA的剪切过程。（如拟南芥miR-171） 3、具有以上两种作用模式，当与靶标基因完全互补结合时，直接靶向切割mRNA；当与靶标基因不完全互补结合时，阻遏基因的翻译（如线虫let-7 ） （四）小RNA的研究的启示 1、基因组非蛋白编码区可能蕴含着重要的生命功能活动信息。 2、生命的一些重要活动如幼虫的生长发育、细胞的发生和分化、神经系统的分化等都被一些非编码小RNA的调控 附：RNA的功能 （1）储存遗传信息，如RNA病毒 （2）mRNA：进行遗传信息的传递，作为蛋白质合成的模板 （3）rRNA：可装配成核糖体，参与蛋白质合成 （4）tRNA：携带氨基酸，参与蛋白质的合成 （5）核酶：内含子的自我剪接等 （6）MicroRNA：基因表达的调控，在发育过程中起作用 （7）SiRNA：抑制病毒、转