第六章虫生线虫及其共生菌在农业上的应用.pptVIP

第六章 蟲生線蟲及其共生菌在農業上的應用 一、 前言 斯氏屬（Steinernema spp.）和異小桿屬（Heterohabditis spp.）線蟲是被研究最多的蟲生線蟲，近年來已逐漸被利用在不同作物上各種害蟲的綜合管理，尤其對土棲害蟲，更具備其他生物製劑所沒有的自動搜尋特性。 Xenorhabdus屬細菌與斯氏屬線蟲共生，光桿菌屬（Photorhabdus spp.）細菌則與異小桿屬線蟲共生，線蟲與共生菌共同完成殺蟲的任務；其中光桿菌屬細菌亦被證明兼具殺蟲及抑菌效果，深具開發為微生物農藥的潛力。 二者的生活史包括自由生活期和寄生期，在自然界中有致病能力的幼蟲會在土壤中尋找昆蟲寄主，經自然開口進入，穿透寄主體腔，釋出共生菌，共生菌於2天內殺死寄主昆蟲，線蟲則在罹病蟲體中完成生活史。 病原線蟲、共生菌和昆蟲幼蟲之間形成微妙的三者關係（tri-trophic system），最貼切的比喻好像特洛伊的木馬屠城：昆蟲幼蟲為城堡，病原線蟲為引進城堡內的木馬，而共生菌就是藏身在木馬內的士兵，也是真正的攻擊主力。 至今共有32種蟲生線蟲已被描述，其中9種已商品化。共生菌的光桿菌則被證明有廣幅的抑菌及殺蟲作用，有潛力成為兼具殺蟲與抗菌作用的生物農藥。 二、蟲生線蟲的生物學及生態學 （一）蟲生線蟲的生活史 斯氏線蟲及異小桿線蟲的生活全期包括卵、幼蟲及成蟲期。生活史中則包括寄生期及尋找昆蟲寄主的自由生活期。 自由生活期的幼蟲對環境變化有抗性，因可侵入敏感性昆蟲寄主，故稱為致病期幼蟲（infective juveniles）。斯氏線蟲及異小桿線蟲的生活史略有差異，異小桿線蟲雌雄同體，而斯氏線蟲在侵入寄主後則行兩性生殖。蕭及朱發現部分侵染性幼蟲在臘蟲幼蟲體內或雞蛋培養基可進行單性生殖。 （二）共生菌及其作用 蟲生線蟲的共生菌屬於腸內桿菌科（Entero -bacteriaceae），屬於兼性厭氧革蘭氏陰性菌。異小桿屬線蟲的共生菌-光桿菌（Photorhabdus spp.）會發光，斯氏線蟲的共生菌Xenorhabdus則不會發光。 線蟲共生菌具雙態型，其中第一型會產生抗生素，第二型則否，具致病力的線蟲，所攜帶的是第一型共生菌。其在昆蟲致病過程所扮演的角色如下： 侵染期的三齡幼蟲被二齡幼蟲的體皮（cuticle）包起來，腸道攜有共生菌，一旦遇到合適寄主，線蟲可經由自然開口或傷口進入血體腔，並在昆蟲體內釋出共生菌，共生菌在昆蟲血體腔內大量繁殖，並在48小時內殺死寄主昆蟲。 （三）線蟲與共生菌的角色定位： （四）寄主範圍 蟲生線蟲的寄主範圍非廣，含鱗翅目32科，鞘翅目18科，雙翅目20科以及直翅目，等翅目、半翅目、同翅目、脈翅目及膜翅目等11目125科250種以上的昆蟲。 線蟲寄生昆蟲後會引起不孕、生殖力下降、壽命減少、飛行力下降、發育遲緩或其他型態、行為或生理之異常，而斯氏線蟲及異小桿線蟲寄生後，更引起昆蟲的快速死亡（2天內）。 蟲生線蟲有出遊型（Cruiser）及伏擊型（Ambusher）兩種行為模式，前者能主動找尋寄主，其致病力與其行動力有關；後者則守株待兔，故其殺蟲成效與寄主昆蟲的分佈有關。 （五）應用蟲生線蟲的優點 具有化學感應器，可感受到昆蟲所排出的CO2及尿素，而朝寄主昆蟲主動趨近。 寄主範圍廣。 致病力強，共生菌所釋出的毒素能在24-48小時內殺死昆蟲。 對脊椎動物及一些無脊椎動物（如蚯蚓、蜘蛛）無害。 培養容易，能採用動物產品如蛋黃、雞肝或植物材料如大豆粉等大量繁殖。 三、生物農藥的明日之星-光桿菌 光桿菌（P. luminescens）為異小桿菌的共生菌，為會發出螢光的桿狀細菌，可從寄主中分離出來培養，目前已分離到至少3個具有不同程度殺菌活性的光桿菌亞種，並證實兼具殺蟲與抗菌的雙重效果。由於全球至今尚未上市兼具殺蟲與抗菌效果的微生物製劑，在未來病蟲害的防治上具備無窮潛力。 （一）光桿菌的殺蟲能力 1998年美國Wisconsin大學的科學家，從光桿菌的培養過濾液中，找到一個高分子的蛋白複合物。 複合物由A、B、C、D四種成分所組成，對鱗翅目、鞘翅目及雙翅目昆蟲都有很強的殺蟲活性，是一種廣譜殺蟲蛋白。 殺蟲蛋白可經量產純化，直接以細菌毒素防治昆蟲，或是將它們的基因選殖到植物體，這種新基因對農作物持久性抗蟲育種具有很大的應用潛力。 （二）光桿菌的抑菌能力 光桿菌能產生多種代謝產物，例如幾丁分解酵素（Chitinase）、脂肪分解酵素（Lipases） 、蛋白酵素（Protease） 、蛋白酵素抑制劑（Protease inhibitor） 、抗生物質（Antibiotics）、脂多醣體（Lipopolysacchar