中药中黄曲霉毒素的检测讲义.pptVIP

中药中黄曲霉毒素的检测;目录;真菌毒素简介;常见真菌毒素分类;真菌毒素监控意义;黄曲霉毒素概述;黄曲霉毒素的发现;存在极其广泛;毒性极强;中药中容易产生黄曲霉毒素的品种;黄曲霉毒素的种类及性质;化学结构;化学结构式;理化性质;纯品为无色结晶 耐高温，黄曲霉毒素B1的分解温度为268℃ 紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性 ;黄曲霉毒素现有检测方法介绍;免疫化学分析方法 ?酶联免疫吸附法：快速、简便、单一毒素、假阳多 ?免疫亲和柱-荧光分光光度法：高效、无毒、假阳多 ?微柱筛选法：半定量，测总量 ?一步式黄曲霉毒素检测金标试纸法：快速、现场大批量初筛 ;黄曲霉毒素检测药典收载情况;2010年版一部第二增补本修订了附录方法 ?删除了流速规定 ??增订了另一种衍生方法：即光化学衍生法 ?取消了免疫亲和柱的品牌规定 2015年版四部通则2351黄曲霉毒素测定法 ?增加了第二法：高效液相色谱-串联质谱法 ?增加附注：“当测定结果超出限度时，采用第二法进行确认” ;2015年版四部通则增加中药中真菌毒素测定指导原则 ?基本原则（中药中真菌毒素的分类、监控品种、测定方法、限值拟定） ?基本内容（高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱联用法） ;2015年版四部通则9302 中药有害残留物限量制定指导原则中关于黄曲霉毒素的规定 “由于黄曲霉毒素毒性强，目前国际上不建议设定黄曲霉毒素的安全耐受量和无毒作用剂量，也无最大限量理论值计算公式，限量越低越好”。 ;《中国药典》2015年版正文收载品种;黄曲霉毒素药典检测方法详解;供试品溶液的制备：15g粉末，3gNaCl，70%甲醇提取，免疫亲和柱纯化 测定： 吸取混合对照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl，注入色谱仪，绘制标准曲线。吸取供试品溶液20-25μl，测定 ;方法来源：《中国药典》2015年版四部通则2351黄曲霉毒素测定法 基本步骤 ?提取 ?净化（活化、上样、洗杂、洗脱） ?测定 ?随行质量控制（质控样、随行加样回收）;泵流操作架;净化步骤;免疫亲和柱的原理;黄曲霉毒素的衍生化;药典附录收载的两种衍生方法 ?碘衍生法：碘作为衍生剂，对衍生温度有要求，试剂对仪器有腐蚀性，需要冲洗 ?光化学衍生法：紫外光灯（254nm ）照射，操作简单，对衍生温度无要求，不需要其他衍生剂，无需冲洗 对黄曲霉毒素B1和G1进行衍生，黄曲霉毒素B2和G2不受该衍生步骤的影响 ;AFB1;黄曲霉毒素的衍生化;结果报告;方法难点;注意事项; 对照品的使用 使用黄曲霉毒素混合对照品，不使用黄曲霉毒素固体纯品自行配置 对照品贮备液避光、低温、密闭保存，工作液现配现用 ;试验废弃物处理 残留有黄曲霉毒素的废液或废渣的玻璃器皿，应泡在专用贮存容器（含10%次氯酸钠溶液内，浸泡24小时以上，再用清水将玻璃器皿冲洗干净） 流动相单独收集，先用次氯酸钠灭毒，再按常规处理 ;实验室的建议;谢谢！