第四章-氨基酸，肽和蛋白质.ppt

第四章 氨基酸、肽和蛋白质;主要内容;——蛋白质的构件分子;实验证据;构成蛋白质的AA只有20余种，且都是α-氨基酸。 除甘氨酸外，19种AA都具有旋光性。 除胱氨酸和酪氨酸外，其余AA都能溶于水。;按Ｒ基的化学结构分类：;二、氨基酸的酸碱性质;H3N—CH—COOH;;（三）氨基酸的等电点;Ka1*Ka2=……;甘氨酸滴定曲线;pI 取决于两性离子(兼性离子)两边pK’值的算术平均值 酸性AA：pI = (pK’1 + pK’R-COO- )/2 碱性AA：pI = (pK’2 + pK’R-NH2 )/2 ;;;（四）氨基酸的甲醛滴定; NH2 OH R CH COOH + HNO2 R CH COOH+H2O+N2 Van Slyke 法测氨基氮（体积）的基础，N2中的1/2为氨基氮。 ;最经典、最易进行的亲核取代反应之一 丹磺酰氯：用于多肽N末端氨基酸的标记和微量氨基酸的定量测定！;NO2;—N=C=S + N—CH—COOH; R’ COOH R’ COO C=O + H2N CH C=N CH H R H R; 在生物体内经AA氧化酶催化 即脱去α-氨基而转变为酮酸。;（2）成酯  NH2 干燥，HCl  R CH COOH + C2H5OH  回流  R CH COOC2H5 + H2O; HN-保护基 R— CH-COOH + PCl5 HN-保护基 R — CH-COCl + POCl3 + HCl; NH2 脱羧酶 R—CH-COOH R-CH2-NH2 +CO2 ; YNH O NH2NH2 R—CH—C—OCH3 YNH O HNO2 R—CH—C—NHNH2  YNH O R—CH—C—N -—N+ N + 2H2O ;（三）羧基和氨基都参加的反应;2、与茚三酮的反应及其应用;Tyr酚基在3和5位上易发生亲电取代反应， 如碘化和硝化;Tyr与重氮苯磺酸生成橘黄色化合物，用于检测酪氨酸;精氨酸Arg侧链胍基与环己二酮生成缩合物;色氨酸Trp侧链吲哚基能被N-溴代琥珀酰亚胺氧化 ——分光光度法测定Trp含量;甲硫氨酸Met侧链上甲硫基：强亲核基团与烃化试剂成锍盐;半胱氨酸Cys的巯基不稳定，易被氧化成二硫键，二硫键可被氧化剂（过甲酸）以及还原剂（巯基化合物）打开。;与二硫硝基苯甲酸发生硫醇-二硫化物交换;四、AA构型和光谱性质;（二）氨基酸的光谱性质;可见光区：无吸收 远紫外和红外区：都吸收 近紫外区（200—400nm）：酪氨酸Tyr/色氨酸Trp/苯丙氨酸Phe 原因：芳香族氨基酸 不饱和体系;Trp 280nm Tyr 275nm Phe 257nm;（一）肽和肽键的结构;①肽键中C-N键有部分 双键性质 ——不能自由旋转 ②组成肽键原子处于 同一平面（肽平面） ③键长及键角一定 ④大多数情况以反式 结构存在;;共价主链 ;（二）肽的物理化学性质;肽的化学性质;1 谷胱甘肽（γ-谷氨酰-半胱氨酰-甘氨酸）;;2 血管紧张肽Ⅱ ;3 催产素 ;1838年，J. J. Berzelius提出，由proteios衍生而来 ——第一重要、首要的物质;一、蛋白质通论;２、蛋白质的含氮量;３、蛋白质的分类;（二）蛋白质的大小与分子量;蛋白质与多肽无严