从番茄中提取番茄红素的初探.doc

PAGE PAGE 7 从番茄中提取番茄红素的初探 摘 要：采取浸提的方法从新鲜番茄中提取番茄红素。通过定性定量检测和纯度的测定，确定了最佳提取工艺为：用匀浆结合超声波破碎番茄并冷冻干燥，然后在室温下用氯仿作为溶剂减压提取，提取率为4.459mg/g番茄干粉；再用无水乙醇去杂，可进一步提高样品的纯度。 关键词：番茄红素；番茄；浸提 番茄红素（Lycopene）又名ψ，ψ-胡萝卜素，化学式为C40H56，其结构为含有11个碳－碳共轭双键、2个非共轭双键的非平面共轭多不饱和脂肪烃，颜色呈红色。番茄红素广泛存在于番茄、胡萝卜、西瓜、红色葡萄柚、木瓜、秋橄榄、番石榴等食物中，其中番茄中的含量较为丰富。研究表明，番茄红素能够有效地淬灭单线态氧，消除体内自由基，诱导细胞间隙连接通讯，促进细胞内的正常结合，降低核酸损伤，抑制癌细胞增殖因子，防治心血管疾病和延缓机体衰老等[1~3]。因此，它已成为一种世界公认的很有发展前途的功能性天然色素。 本实验选用市售新鲜番茄为原料，利用番茄红素不溶于水，难溶于甲醇、乙醇，易溶于石油醚、乙烷、丙酮、氯仿、乙醚等有机溶剂的性质，采取减压索氏提取法来提取番茄红素，并对提取产物进行定性定量分析，确定最佳的提取工艺过程。 1 材料和方法 1.1 药品和仪器 氯仿、无水乙醇、正己烷、石油醚、苯、苏丹Ｉ色素 (AR,西安化学试剂厂)、新鲜番茄(市售)、冷冻干燥机(LABCONCO)、超声波破碎机(上海新艺生物技术研究所JY98-Ⅲ)、离心机(GL-21M)、紫外可见扫描仪(日本岛津UV-2501PC)、微波炉(MICRDWAVE OVEN-b3OD)、 1.2 提取流程 新鲜番茄→破碎→离心→收集沉淀→冷冻干燥→去杂→有机溶剂浸提→提取液。 1.3 分析方法 1）番茄红素的定性测定：紫外可见光扫描法[4]。 2）番茄红素的定量测定：标准曲线法[5]。 3）纯度的测定：薄层层析法[6]。 2 结果与讨论 2.1 番茄红素光谱特性的测定 将提取液置于波长为200～600 nm下，做紫外可见光扫描，得出图谱见图1。从图1可见，扫描图谱的最大吸收峰为481.5 nm，与文献[3]报道的特征吸收峰一致。 图1　提取液的紫外可见吸收光谱 Fig.1 Spectrum of lycopene in extract 2.2 番茄红素的测定 由于番茄红素标准品价格昂贵，且见光易分解，而苏丹Ι与番茄红素有类似的特征吸收峰，故用苏丹Ι代替番茄红素标准品绘制标准曲线。准确称量50 mg苏丹I，用无水乙醇溶解并定容至100 mL，得母液浓度为0.5 mg/mL, 从母液中吸取0.26，0.52，0.78，1.04，1.30 mL分别注入50 mL的容量瓶中，用无水乙醇均定容至刻度，充分混合，它们分别相当于0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 μg/mL的番茄红素，以无水乙醇作为参比溶液，在481.5nm下测定吸光值并绘制标准曲线，结果见图2。 图2　标准曲线 Fig.2 Standard curve 2.3 提取方法的优化 2.3.1 溶剂的选择 称取5份番茄干粉，在相同的条件下分别用乙醚、石油醚、乙烷、丙酮和氯仿进行提取，其提取率=(浓度体积)/番茄干粉的质量，得出提取率见表1。由表1知，乙醚作提取剂的提取效果最好，氯仿次之。但是，考虑到乙醚极易挥发，易燃易爆且不易回收，故本实验采用氯仿作为提取剂。 表1 不同溶剂对提取率的影响 Tab.1 Effect of the different solvent on extraction rate 溶剂 乙醚 石油醚 己烷 丙酮 氯仿 提取率/mg·g-1 4.648 1.834 2.074 0.7732 4.459 2.3.2 破碎方法对提取率的影响 称取5 kg新鲜番茄，匀浆破碎后分成3等份，取2份分别再采用超声波破碎和微波辐射。对以上3份番茄浆进行冷冻干燥后，用氯仿分别进行提取，结果见表2。由表 表2 破碎方法对提取率的影响 Tab. 2 Effect of extraction rate by method of fragmentation 破碎方法 匀浆破碎 匀浆，超声波破碎 匀浆，微波辐射 提取率/mg·g-1 1.293 4.459 4.132 2.3.3 去杂方法对提取率的影响 称取3份番茄干粉样品，在相同的条件下选用氯仿进行浸提。样品１直接用氯仿进行浸提；样品２先用无水乙醇进行提取，直至提取液无色，换用氯仿进行提取；样品3先用28％的乙醇浸泡后抽滤，反复至滤液无色，再用72％的乙醇沸腾7～10 min[7]，抽滤，蒸馏水淋洗后冷冻干燥，最后利用氯仿进行提取，结果见表3。由表