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[核心精要]
1.试剂检测法——鉴定酶的本质
(1)设计思路:从酶的化学本质上来讲,绝大多数酶是蛋白质,少数酶是RNA。在高中教材中常见的一些酶,如淀粉酶、蛋白酶等,其本质都是蛋白质,所以,对酶本质的鉴定常常是变相地考查蛋白质的鉴定方法。因此,利用双缩脲试剂可与蛋白质产生紫色反应的原理制订实验方案即可。
(2)设计方案
①探究酶的本质是否为蛋白质
项目
实验组
对照组
材料
待测酶溶液
已知蛋白液(等量)
试剂
分别加入等量的双缩脲试剂
现象
是否呈现紫色
呈现紫色
结论
实验组呈现紫色说明该酶的化学本质为蛋白质,否则该酶的化学本质不是蛋白质
②探究酶的本质是否为RNA
2.对比法——探究或验证酶的高效性、专一性及影响酶活性的因素
(1)验证酶的高效性
①设计思路:验证酶高效性的方法是对比法,即通过对不同类型催化剂(主要是与无机催化剂进行比较)催化反应物的反应速率进行比较,得出结论。
②设计方案
项目
实验组
对照组
材料
等量的同一种反应物
试剂
与反应物相对应的酶溶液
等量的无机催化剂
现象
反应速率很快或反应用时短
反应速率缓慢或反应用时长
结论
酶具有高效性
说明:实验中自变量是催化剂的种类(酶与无机催化剂),因变量是反应物的反应速度。
(2)验证酶的专一性
①设计思路:验证酶的专一性的方法也是对比法,常见的方案:反应物不同但酶相同,最后通过观察酶促反应能否进行而得出结论。
②设计方案
项目
方案
实验组
对照组
材料
与酶相对应的反应物
另外一种反应物(等量)
试剂
同一种酶(等量)
现象
发生反应
不发生反应
结论
酶具有专一性
(3)探究不同环境因素对酶活性的影响
①设计思路:采取对比的手段,将待探究的环境因素施加到实验组上,将其与对照组比较,观察酶促反应速率的变化,就可确定该环境因素对酶活性的影响。
②设计方案
项目
实验组
对照组
材料
等量的同一种反应物和等量的同种酶
试剂
待探究的环境因素
蒸馏水或其他无关变量
现象
反应速率快或慢
为正常的反应速率
结论
实验组反应速率快→该环境因素对酶活性有促进作用;实验组反应速率慢→该环境因素对酶活性有抑制作用;实验组反应速率没有变化→该环境因素对酶活性无影响
3.梯度法——确定酶的最适温度和pH
(1)设计思路:常用“梯度法”来探究酶的最适温度(或pH),设计实验时需设置一系列不同温度(或pH)的实验组进行相互对照,最后根据实验现象得出结论。
(2)一般步骤
组别编号
1
2
…
n
实验材料
等量的同种反应物和等量的同种酶
温度(或pH)
T1(a1)
T2(a2)
…
Tn(an)
衡量指标
测定相同时间内,各组生成物的量,或反应物的剩余量
实验结论
生成物最多的一组,或反应物剩余量最少的一组所处的温度(或pH)最接近最适温度(或pH)
说明:探究酶最适温度(或pH)的实验过程中,应注意在反应物和酶混合之前,应让反应物和酶首先达到实验温度(或pH),如果先混合再调整温度(或pH),则在达到实验温度(或pH)之前,反应已经进行,实验结果不准确。探究酶催化作用的最适温度(pH)实验中,选择反应物和对应的酶时应注意温度(pH)本身是否会影响反应物的反应速率。如探究酶的最适温度时,不能选用H2O2作反应物,因为温度会影响H2O2的分解速率。
eq \a\vs4\al([对点练习])
1.瑞典研究人员发现一种促进脂肪细胞生成的蛋白质——抗酒石酸酸性磷酸酶。这一发现有望为治疗肥胖症开辟新途径。下列有关叙述不正确的是( )
A.抗酒石酸酸性磷酸酶与脂肪的共有元素有C、H、O
B.在适宜条件下,蛋白酶可以将抗酒石酸酸性磷酸酶水解
C.抗酒石酸酸性磷酸酶遇双缩脲试剂呈现紫色
D.理论上可以通过促进抗酒石酸酸性磷酸酶的功能来治疗肥胖症
D [抗酒石酸酸性磷酸酶的本质是蛋白质,和脂肪共有的元素有C、H、O,A正确;在适宜条件下,该酶可被蛋白酶分解,可与双缩脲试剂发生紫色反应,B、C正确;抗酒石酸酸性磷酸酶能促进脂肪细胞生成,若促进其功能,则会使脂肪细胞增多,不能用来治疗肥胖症,D错误。]
2.下列与酶相关实验的叙述中,正确的是( )
A.探究酶的高效性时,自变量可以是酶的种类
B.探究淀粉酶的专一性时,自变量只能是酶的种类
C.探究pH对酶活性的影响时,自变量不止一种
D.探究温度对酶活性的影响时,因变量不止一种
D [探究酶的高效性时,自变量是催化剂的种类,A错误;探究淀粉酶的专一性时,自变量也可以是底物种类,B错误;探究pH对酶活性的影响时,自变量只有pH,C错误;探究温度对酶活性的影响时,因变量可以是产物的生成速率或底物的消耗速率,D正确。]
3.下列有关酶的实验设计思路正确的是( )
A.利用淀粉、蔗糖、淀粉酶和碘液验证酶的专一性
B.利用过氧化氢和过氧
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