第四章基因工程的载体.pptVIP

第四章 载体 vector 主要内容 载体的概念 载体的分类 质粒载体 λ噬菌体载体 单链丝状噬菌体载体 一．载体的概念： 1.要把一个有用的基因（目的基因——研究或应用基因）通过基因工程手段送到生物细胞（受体细胞），需要运载工具（交通工具），将外源DNA或者基因携带进入宿主细胞的工具。 　　2.凡来源于质粒或噬菌体的DNA分子，可以插入或克隆DNA片段统称为vector。 　　基因工程所用的vector实际上是DNA分子，是用来携带目的基因片段进入受体细胞的DNA。 载体应具备的条件 （1）在宿主细胞内能够进行自我复制，具备复制原点。 （2）有合适的限制性内切酶位点，每种位点最好有且只有1 个，供外源DNA的插入且不影响其复制； （3）有选择标记，例如抗药性标记，蓝白斑试验，便于筛选； （4）有一定容量且有较高的拷贝数，易于制备。 　 克隆载体（cloning vector） 都有一个松弛的复制子，能带动外源基因，在宿主细胞中复制扩增。 它是用来克隆和扩增DNA片段（基因）的载体。 表达载体（Expression vector） 具有克隆载体的基本元件（ori,Ampr,Mcs等）还具有转录/翻译所必需的DNA顺序的载体。为了有效的转录，必需有强大的能够被宿主细胞识别的启动子，