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- 2019-10-13 发布于江苏
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筛选标记和目的基因;筛选标记基因是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用。
在基因工程意义上来说,它是重组DNA载体的重要标记,通常用来检验转化成功与否
筛选标记基因在遗传转化中担负着区分转化体和非转化体的重要作用。
合适的筛选标记基因及其相应的筛选剂是转基因成功的关键。;1.新霉素磷酸转移酶 II(NPT II)(npt II) nptⅡ基因最初是从大肠杆菌转座子 Tn5 中分离得到的, 即氨基糖苷磷酸转移酶 Ⅱ 基因, 它编码的氨基糖苷磷酸转移酶使抗生素被磷酸化而失活。因此 nptⅡ基因作为筛选标记基因可以使转化细胞对抗生素如卡那霉素、 G418、 巴龙霉素、 新霉素等产生抗性, 进而达到筛选的效果。目前, 该基因仍是植物基因工程中运用很广泛的选择标记基因。
2.潮霉素磷酸转移酶(HPT)(hpt) 从大肠杆菌中分离出来的 hpt 基因可以编码 HPT, 使其具有潮霉素 B的抗性。hpt 基因被证明是单子叶植物较为理想的筛选基因,因其选择效率高、 基因型差异小、 对转化细胞不产生或很少产生毒害作用、 再生的转基因植株育性较好等优点在水稻、玉米和小麦等作物上得到了广泛应用。目前, 大多数转基因水稻的有关研究中, 均以 HPT 作为抗性选择标记。;3.草丁膦 N -乙酰转移酶(PAT)(bar) 编码 PAT 的 bar基因最初是从吸水链霉菌
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