基于Pd非标记型C-反应蛋白免疫传感器的研制.pdfVIP

Vol.36 高等 学校 化 学 学报 No.10 2015年10月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICALJOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES摇 摇 摇 摇 摇 摇 1880 ~1887 doi:10.7503/ cjc 摇 摇 基于Pd/ COF鄄LZU1非标记型 C鄄反应 蛋白免疫传感器的研制 刘婷知,夏介仁,李摇 瑶,陈文凯,张摇 帅, 刘摇 仪,郑摇 丽,杨云慧 (云南师范大学化学化工学院,昆明650500) 摘要摇 采用溶剂热法,通过有机单体合成了一种亚胺键连接的共价有机框架材料(COF鄄LZU1);在常温常压 条件下,通过后合成的方法将贵金属钯(域)引入到COF材料中,合成了复合材料Pd/ COF鄄LZU1,该材料具 有优良的催化性能. 利用Pd/ COF鄄LZU1多孔复合材料将C鄄反应蛋白(CRP)抗体(anti鄄CRP)固定在玻碳电极 表面,构建了一种非标记型CRP免疫传感器. 当抗体与抗原发生免疫反应时,形成的免疫复合物会阻碍电 4-/ 3- 化学探针[Fe(CN) ] 的电子传递,降低其响应电流,从而实现CRP 的快速检测. 采用交流阻抗和差示脉 6 冲伏安法(DPV)考察了免疫传感器的电化学特性,同时考察了测试底液的pH值、抗原培育时间和抗体固定 浓度等实验条件对传感器性能的影响. 在最优的实验条件下,采用 DPV法对 CRP进行检测的线性范围为 5~180 ng/ mL,检出限为1郾66 ng/ mL,线性相关系数为0郾992. 关键词摇 钯负载共价有机框架材料;C鄄反应蛋白;免疫传感器;非标记型 中图分类号摇 O657郾1摇 摇 摇 摇 文献标志码摇 A C鄄反应蛋白(C鄄Reactive protein,CRP)是机体组织感染、炎症及受损时引起某些血清蛋白浓度的变 化而刺激肝细胞合成的急性相蛋白. CRP是炎症的一种敏感性指标,正常情况下以微量形式存在于血 浆中,当机体有炎症及创伤时此蛋白含量会明显升高. 近年来研究发现,血浆CRP水平与动脉粥样硬 [1] 化的发生、发展、预后及危险因素有一定的相关性,是动脉粥样硬化的重要介质 . CRP 的检测被广 泛用于监测不同的炎症状态,也可用于监测对炎症的治疗效果. 随着高灵敏度检测方法的不断发展, [2] CRP还是心血管疾病的有效预测因素 . 同时,血清中CRP是监控早期心脏受损的一项指标,是最新 [3,4] 发现的冠心病相关炎性因子,在冠心病的诊断过程中发挥着重要的作用 . [5] [6] 目前,临床上诊断血清中CRP常用的检测方法有比浊法 和免疫浊度法 ,以及酶联免疫吸附、 [7] 化学发光、荧光及放射等方法 . 这些方法虽然灵敏度高、特异性强,但也存在如设备昂贵、操作繁 琐,需专业人员操作,检测时间长,样品消耗量大及成本高等缺点,且容易产生假阴性结果. 因此,迫 切需要找到一种快速检测CRP 的方法. 电化学免疫传感器将免疫分析技术与电化学传感器相结合,具 有成本低、灵活性强灵敏度高和检测快速方便等优点,在临床检测中应用广泛,因而最具有发展前景. [8] Zh