项目四发酵工业的无菌操作.pptx

;;一、发酵工业污染的防治策略;（一）污染的危害;1.染菌对不同发酵过程的影响; B.霉菌PenG：青霉素水解酶上升，PenG迅速破坏，发酵一无所获。柠檬酸：pH2.0，不易染菌，主要防止前期染菌。C. 酵母菌: 易污染细菌以及野生酵母菌 D. 疫苗：无论污染的是活菌、死菌或内外毒素，都应全部废弃。;（2）染菌种类对发酵的影响;2.染菌发生的不同时期对发酵的影响;;（2）发酵前期染菌 发酵前期易染菌，且危害很大，需特别注意防止 一旦发现染菌，如原料营养还比较丰富，则进行重???灭菌、接种发酵；如已消耗较多营养物质，则放掉部分料液、补充新鲜培养基，重新灭菌、接种发酵。 ;;;3.染菌程度对发酵的影响;4.染菌对产物提取和产品质量的影响;对过滤的影响;对提炼与产品质量的影响;二、杂菌污染的防治;某药厂链霉素发酵染菌原因分析;1.污染杂菌的检测;发酵过程的异常现象;溶解氧水平异常变化显示染菌;CO2异常显示染菌;2.污染噬菌体的检测;;;26;27;28;29;30;31;32;33;34;35;36;37;3.污染原因的分析;（1）染菌的时间分析 种子培养阶段：种子，灭菌，操作； 发酵前期：种子，灭菌，操作； 发酵后期：空气，补料，设备渗漏，泡沫;（2）染菌的杂菌种类分析： 污染耐热芽孢杆菌：培养基或设备灭菌不彻底； 污染不耐热杂菌：种子带菌、空气除菌不彻底、设备渗漏或操作问题； 污染浅绿色菌落杂菌：冷却盘管渗漏引起； 污染霉菌：无菌室灭菌不彻底，或操作问题； 污染酵母菌：糖液灭菌不彻底。;（3）染菌的规模分析 大批量发酵罐染菌：种子、空气； 前期：种子带菌，灭菌问题； 中后期：空气带菌； 部分发酵罐染菌： 个别发酵罐连续染菌：设备渗漏 ;（1）种子带菌及其防止 原因 ：菌种培养或保藏过程染菌、培养基及用具灭菌不彻底、菌种移接过程污染 措施： 严格控制无菌室污染，严格无菌操作； 种子保存管的棉花塞应有一定的紧密度，且有一定的长度； 培养和保存温度不宜有太大变化； 菌种培养基或器具进行严格的灭菌处理 ； 每一级种子培养物均应经严格检查，确保未受污染后才能使用;（2）空气带菌及其防止 空气的净化工艺和设备的设计 过滤介质的选用和装填 过滤介质的灭菌和管理等 ;（3）培养基和设备灭菌不彻底染菌及防止 原料含较多菌 未充分排除罐内空气 灭菌温度、时间未控制好 设备、管道存在死角 ;原料性状：淀粉质原料，升温过快或混合不均匀，易结块，团块中包埋的活菌不易杀灭；可升温前搅拌和加淀粉酶。 实罐灭菌时未充分排除罐内空气：造成假压，升温时，应打开排气等阀门放气。 连续灭菌时，蒸汽压力波动大，培养基未达到灭 菌温度，导致灭菌不彻底。 ;D.设备和管道存在“死角” 死角：由于操作、设备结构、安装或人为造成的屏障等原因，引起蒸汽不能有效到达或不能充分到达预定应该到达的局部灭菌部位，从而不能达到彻底灭菌的要求。 ;常见的设备、管道“死角” 发酵罐的“死角”：不锈钢衬里破裂造成死角，发酵罐罐底脓疱状积垢。;;;（4）设备渗漏染菌及防止 原因 发酵罐、补糖罐、冷却盘管、管道阀门等，因加工制作不良或遭受腐蚀等原因而形成微小漏孔后发生渗漏染菌。 措施 选用优质材料、科学合理加工、经常检查。 ;（5）操作失误染菌及防止 淀粉原料采用实罐灭菌，大颗粒应先筛去，再搅拌均匀，加入一定量淀粉酶液化或糖化后灭菌。 在灭菌升温时，要打开排气阀门，排尽罐内冷空气。 严防泡沫升顶，可添加消泡剂防止泡沫的大量产生。 严格控制灭菌温度，避免蒸汽压力的波动过大。 发酵过程越来越多采用自动控制，控制仪器如用化学试剂灭菌，一定要彻底。 ;（6）噬菌体污染及其防治 ; 噬菌体污染根本原因 生产中把活菌体排放到环境中，造成了自然界中相应噬菌体大量增殖。 这些噬菌体随风沙尘土和空气流动到处传播，有可能潜入生产的各个环节，尤其是通过空气系统进入种子室、种子罐、发酵罐。;噬菌体的防治;2、染菌的处理 ;;;;;;采取哪些措施能够保持无菌发酵？;三、发酵工业的无菌操作技术;二、发酵工业无菌操作的基本概念;二、发酵工业无菌操作的基本概念;（一）加热灭菌法;;;;;;;;;;;;注意事项 灭菌包不宜过大过紧，灭菌器内物品的放置总量不应超过灭菌器柜室容积的85%。各包之间留有空隙，以便于蒸汽流通、渗入包裹中央，排气时蒸汽迅速排出，保持物品干燥。 盛装物品的容器应有孔，若无孔，应将容器盖打开。 布类物品放在金属、搪瓷类物品之上。 灭菌锅密闭前，应将冷空气充分排空。 随时观察压力及温度情况。 注意安全操作，每次灭菌前，应检查灭菌器是否处于良好的工作状态。 灭菌完毕后减压不要过猛，压