非发酵菌-公开课件（讲义）.ppt

 非发酵革兰阴性杆菌 定义 非发酵革兰阴性杆菌，指一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌；多为条件致病菌。 O-F试验 非发酵革兰阴性杆菌包括假单胞菌属、产碱杆菌属、无色杆菌属、不动杆菌属、莫拉菌属、金氏杆菌属、黄杆菌属、艾肯菌属、土壤杆菌属、黄单胞菌属、丛毛单胞菌属等。 分群依据 氧化酶试验 葡萄糖氧化发酵试验 动力试验 二、 非发酵初步分群 假单胞菌属 假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无荚膜的革兰阴性杆菌，氧化酶试验阳性，DNA G+C为58～71mol％，包括200余种菌。多数为腐生菌，少数为植物和动物寄生菌，大多为条件致病菌。 代表菌株为铜绿假单胞菌 假单胞菌属分布广泛，土壤、水和空气中均有存在，人类非发酵菌感染中，假单胞菌占70％～ 80％，主要为铜绿假单胞菌，其他较为常见的菌种有嗜麦芽窄食单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等。这些菌种也是医院感染的主要病原菌。 微生物特性 共性 :G-杆菌，无芽孢，有荚膜，多数菌有鞭毛，专性需氧菌，生长温度范围广，最适35度 ，普通培养基上可以生长，可产各种水溶性色素。抵抗力强，多种抗生素耐药 微生物检验 2.鉴定：氧化分解葡萄糖、产酸不产气，触酶氧化酶阳性，吲哚 、甲基红、VP阴性。 微生物检验 3.药敏试验 A组：头孢他定、庆大霉素、美洛西林、替卡西林、哌拉西林 B组：头孢吡肟、头孢哌酮、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、妥布霉素、环丙沙星 C组：头孢噻肟、氯霉素 U组：羧苄西林、头孢唑肟、四环素、诺氟沙星、SMZ  铜绿假单胞菌 铜绿假单胞菌广泛存在环境中，加之多种传播途径和污染，因此易感染,特别是免疫力低下的患者。引起: 1.皮肤感染、呼吸道感染、泌尿道感染、烧伤感染 2.菌血症、心内膜炎、囊性纤维变性 3.感染眼部的铜绿假单胞菌，可以合成胶原酶，以致引起角膜穿孔而失明。 生物学性状 形态与染色：G- 杆菌，多形性，有鞭毛、菌毛、荚膜，无芽孢,产荧光素和绿脓素 培养特性：专性需氧，4℃不生长42 ℃生长，在血平板上经35—37℃，18—24h培养可表现为：菌落大而扁平、湿润、边缘不齐,有金属光泽,有生姜样芳香气味,菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。 生物学性状 普通琼脂培养基上能产生水溶性绿色素，使整个培养基变为绿色。MAC培养基上，18-24h可形成微小无光泽半透明的菌落。SS平板上可行成类似沙门菌的菌落。 生物学性状 生化反应：氧化酶阳性，触酶阳性，O/F氧化型，精双（+）还原硝酸盐。 抗原构造和分型：菌体O,鞭毛H,粘液S和菌毛抗原。 抵抗力:耐潮湿、干燥、紫外线，不耐热和消毒剂，临床分离的菌株多耐药。 铜绿假单胞菌检验 1．标本采集 按疾病和检查目的，分别采 取不同的标本：患者的血液、脑脊液、胸(腹)水、脓液、分泌液、痰、尿液、十二指肠引流液、粪便等；医院病区或手术室的空气、水、地面、把手、医疗诊断器械及生活用品。 检验程序 检验方法 直接镜检：G-杆菌 分离培养：在普通培养基生长良好，经18—24h形成圆形、扁平隆起、湿润菌落。琼脂被染成绿色或黄绿色，约80％-90％产生绿脓素或荧光素。在血平板上表现为：菌落大而扁平、湿润、边缘不齐；有金属光泽；有生姜样芳香气味；菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。 检验方法 鉴定：氧化酶阳性，触酶阳性，O-F试验氧化型、木糖产酸不产气，液化明胶，还原硝酸盐产生氮气，吲哚阴性，利用枸橼酸盐，精氨酸双水解酶阳性。 铜绿假单胞菌快速鉴定要点： 1、能产生绿色素。 2、血平板上菌落大而扁平、湿润、边缘不齐；有金属光泽；有生姜样气味；菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。 3、氧化酶阳性 检验结果分析与报告 1.结合感染症状，在血、尿及无菌体液中检出特别是重复检出即可确定为病原菌。 2. 若无感染症状，特别是儿童，检出的革兰阴性杆菌可视为正常菌群。 3.注意铜绿假单胞菌的耐药性。  嗜麦芽窄食单胞菌 分 类 分类曾经过两次反复 ，最终定为假单胞菌属。 临床意义 分布广泛，为条件致病菌，可引起抵抗力低下患者呼吸道、泌尿道、伤口等部位的感染，严重者可出现菌血症和心内膜炎。 假单胞菌的感染中居第二位，非发酵菌所致的感染中居第三位。 微生物特性 G-杆菌，具有端鞭毛1-8根，有动力，无芽孢无荚膜。 微生物检验 标本采集：血液标本先增菌后分离培养，其他标本直接接种。 分离培养：营养需求不高，在血平板和普通琼脂平板上生长良好，经35℃培养18-24h后可形成中等大小、圆形、光滑、湿润、不溶血的菌落，并可产黄色色