DNA重组和基因转移教学幻灯片.pptVIP

2、病毒介导的基因转移 （1）双链DNA病毒转化载体 这类病毒是以双链DNA作为遗传物质，在这类病毒中，目前研究的最多的是花椰菜花叶病毒（简称CaMV, Caullinus Mozic Virus）。 （2）单链DNA病毒转化载体 GeNV顾名思义，可翻译成“双联体病毒”或“孪生病毒”。GeNV的感染范围较广，包括单子叶和双子叶植物，它们的传播媒介是昆虫。 （3）单链RNA病毒转化载体 迄今为止，还没有建立起一个完善的以植物RNA病毒为基因载体的基因转化体系，但是RNA病毒仍是一个很有希望作为基因工程载体的植物病毒。 第七章 DNA重组和基因转移 第一节 目的基因与载体的连接 一、粘末端DNA片段的连接 （一）具有相同粘末端的DNA分子之间的连接 使用碱性磷酸酶处理载体DNA，去掉其5’末端的磷酸基，以防质粒DNA的自身环化 。 （二）具有不同粘性末端的DNA分子之间的连接 用两种不同的限制性内切酶对载体和外源DNA进行切割后，在它们两端会产生非互补的突出端，经DNA连接酶连接后即产生定向重组体。 HindIII EcoRI HindIII EcoRI 对载体酶切 HindIII EcoRI 对基因酶切 质粒载体的定向重组 2、同聚物加尾法 3、衔接物连接法 衔接物是指用化学方法合成的一段由10～12个核苷酸组成，具有一个或数个限制酶识别