离心浓缩技术.docVIP

Thermo离心浓缩系统介绍 一．为什么用离心浓缩? 对于 生物样本 脆弱样本 采用电泳，GC，HPLC 等方法分析和处理的样本都很适于采用离心浓缩 二．离心浓缩的目的 1．浓缩样本，同时还避免以下问题： 1）交叉污染 2）样本丢失 3）样本变性 4）样本活性下降，氧化 2．同时兼备以下优点: 1)高的回收率 2)对环境无害 3)操作简单 三．与离心技术的区别 1)离心分离 将悬浮的固体从液体中分离出来 2)离心浓缩 溶液 。偶尔, 样品会完全干燥，在这种情况下, 样品必须是无机物，或者在干燥后马上被取走 四．离心浓缩技术 1)抽真空，降低气压，从而降低溶剂的沸点，使溶剂能在低温下蒸发 2)给腔体施加热量 (能量) ，从而提高蒸发速率- 3)样本温度不会升高 ! 4)样本在适宜的离心转速下离心，产生少量的“g”离心力，这样就防止了由于“暴沸”而产生的样本损失，或者由加热和离心浓缩很容易引起的离心管内布满泡沫现象 五．真空效益 1)在既定的气压下，溶剂的沸点是固定的. 2)对不同的溶剂施加不同的能量，对样品温度不会产生任何影响，因为样品的特定的气压下沸点是一定的，只要蒸发还在进行，样品的温度就没有变化 六．原理 – 真空效益 1)低溶剂的气压 (提高真空度) 这是一个关键因素！ 2)液体的沸点在真空状态下会降低. 3)真空同时还能将未浓缩的气体从腔体中吸走，从而减少蒸汽流向冷阱时的遇到干扰和阻力. 4)通过快速蒸发溶剂，可保持样品的低温状态 七．原理 – 能量需求 1) 能量（热量）的输入，可补充蒸发过程所需要的能量，对于加快蒸发速度是非常重要的 2)能量必须是间接施加给样品，否则，样品必然会被局部加热，从而导致损害样品. 3)真空状态下对流是不可能发生的，因此采用辐射加热腔体温度能高达 80° 而样品的温度却能保持在起沸点下 (或许是 5°C) ，直到样品完全干燥了温度才会上升 4)如果样品在真空状态下沸点很低，在不给样品施加能量的情况下让样品如果持续蒸发，样品很可能会结冰,浓缩也就不可能了! 八．原理 –‘g’ 离心力效应 1. 当溶剂蒸发 (沸腾), 会形成气泡 = 2. 溶剂往往会“暴沸”或起泡，会有小液飞溅到管外. 3.让样品在离心浓缩仪里旋转，产生足够的‘g’ 离心力，就能让样品停留在离心管内. 4. 无样品损失. 5.无交叉污染. 6.样品被浓缩了或干燥后附着在管底,对于定量回收是最理想的 7.在角转头里，液体的表面积提高了，因此加快了样品蒸发和浓缩的速率原理 – 样品的安全性! 九．非常重要 ! 1. 热敏感样品是不允许被完全干燥的. 2. 在相变过程中能量的吸收引起的低温效应消失了，也就无法给样品提供保护. 3. 真空压力计就可以用于判断是否浓缩的临界点 4.开始运行以后，马上观察最大真空度 [最小气压] 5.蒸汽的产生会导致气压的上升,随着溶剂的持续蒸发和减少，产生的蒸汽也会越少,气压也会下降. 6.在达到最小气压以前停止运行.样品仍然是湿的. 十．结论 如果离心样品，在一个适宜的离心速度 / ’g’ 离心力，在真空状态下，通过辐射给样品补充能量，样品将在非常安全的状态下被浓缩。 一．离心浓缩系统 1.完整的系统应包含以下部件 最简单的配置 : 浓缩仪,转头, 连接管线, 真空泵 2.完整的系统应包括 在完善的配制 : 浓缩仪, 转头，隔膜泵，或高真空油泵以及油过滤器，连接管线, 冷阱，烧瓶，化学阱和吸收柱， 真空控制阀，真空压力计，手推车 二．浓缩仪的功能 1离心 2真空控制 3在应用真空以前必须先以足够的rpm离心 4能量 5resistance heating of bowl (all models) 6盖子上的辐射加热灯 7加热盖 8腔体上的加热灯 9run timer 控制整个运行时间 10 heat timer 控制加热时间，防止样品过热，保护样品 三．浓缩仪的设计 – 冷阱 １SpeedVac 冷阱温度范围: -5°C