单一免疫组化染色二.pptVIP

发展史 发展史 ABC法标记技术 四重免疫标记技术 三重免疫荧光标记技术 抗体孵育 第二抗体 凤舞九天-褚华硕（Olympus全国显微图像大赛) 解决方案 1）新鲜组织、及时固定 2）一抗或二抗前封闭 3）掌握抗体孵育时间、温度 4) 避免抗体交叉反应 体会 1、“痛己之不足”，忌不总结 2、“柳暗花明又一村”，忌盲目执着 3、“三人同行必有我师”，忌闭门造车 常见问题及原因分析 问题一 “无色片” 设立阳性对照 1）真阴性结果 Neuron GFAP 解决方案 设立阳性对照 (同一部位使用不同抗体进行检测） 2）假阴性结果 常见问题及原因分析 原因：①操作不当 ②抗体原因 常见问题及原因分析 问题二 “杂音染色” “杂音”染色种类繁多，产生的原因也多种多样 1）调整抗体浓度 2）抗体孵育时间或温度 3）抗体覆盖完全，减少流失 4）组织切片漂洗时间、是否有气泡 1）全片着色 2）边缘着色 3）阴阳脸 4）灶片状着色 常见问题及原因分析 问题三 “背景过高” 解决方案 1）调整抗体效价 2）血清等进行封闭 3）充分漂洗 4）合宜的切片厚度 常见问题及原因分析 问题四 “非特异着色” 切片破损 切片刀痕 切片干燥 切片皱褶 切片脱落 常见问题及原因分析 TEL：774562 科技大楼1607 Thank you * * Use a section heade