生物技术 第四组 绿叶中色素的提取和分离实验改进、探索 一、实验目的 1、回顾传统实验中叶绿素的提取和分离方法; 2、在以前实验的基础上对叶绿素的提取和分离进行改进、探索; 3、培养学生积极思考、自主探索的能力,树立正确的价值观。 二、实验原理 1、各种色素能溶解在有机溶剂(无水乙醇等)中形成溶液,使色素从生物组织中脱离出来; 2、各种色素都能溶解在层析液中,但在层析液中的溶解度不同。溶解度大的色素分子随层析液在滤纸上扩散得快,反 之则慢,因而不同色素可以在滤纸上通过扩散分开,各种色素分子在滤纸上可形成不同的色素带。 三、实验器材、材料 实验器材:酒精灯、铁架台、烧杯、试管、试管架、试管夹、剪刀、吸管、载玻片、盖玻片、 试剂:无水酒精、层析液(石油醚:丙酮=10:1)[改进后] 二氧化硅、碳酸钙 实验材料:菠菜叶、桂花树叶 四、实验步骤 改进前 改进 改进一:实验材料由菠菜叶改为桂花树叶 本实验对所选材料的要求应该是颜色深、含水较少。而菠菜叶片含水量多,经研磨过滤得到的滤液中,色素含量有点偏淡,导致纸层析后的色素带,其中三条(即胡萝卜素、叶绿素a、叶绿b)颜色鲜艳,而叶黄素的颜色偏浅。而且菠菜具季节性,市场上也较贵。 采用桂花叶有如下优点: 1)、颜色浓绿,含水量少 2)、取材方便,我校校园内有许多高大的桂花树,可以随时取用; 3)、桂花是常绿树种,不受季节的限制。 但桂花叶比菠菜叶难以研磨,联想到酒精沸水浴可以给绿叶脱色,所以又做出了本实验的第二个改进: 改进二:研磨提取色素改为酒精沸水浴提取,具体操作为: ?1)、将2克桂花叶(约3片)去掉主叶脉后叶片剪碎装入试管; 2)、倒入5ml的无水酒精,使叶片刚好全部浸泡到酒精中 3)、将试管放入装有开水的烧杯中水浴加热5-6分钟,色素溶于无水酒精得到色素提取液。 通过对比操作发现:沸水浴酒精溶解色素法比研磨法提取色素好。该法不仅取材容易而且节约时间、节约药品,第三是环保,第四是色素提取液量足且颜色深。 改进三:毛细吸管划滤液细线法改为直接蘸取法 ? 绘制出来的滤液细线要求“细、直、齐”,毛细吸管划滤液细线不是太粗就是不齐,要不就是把纸划破,直接影响实验效果,而且毛细吸管容易断裂,造成实验器材损耗过大。 圆盘法分离色素: 在圆形滤纸中央滴一滴研磨液,在研磨液处用牙签扎一个小孔,再在小孔处插入滤纸小棒作为滤纸与层析液中的桥梁,在表面皿中加入适量的层析液,最后把插有滤纸棒的圆形滤纸盖在表面皿上,观察色素分离效果。 结果表明:圆形滤纸上形成四个同心圆,由内到外依次是黄绿色、蓝绿色、黄色、橙黄色。 五、实验结果 实验改进前: 实验改进后: 圆形滤纸上形成四个同心圆,由内到外依次是黄绿色、蓝绿色、黄色、橙黄色。 ?色。 六、注意事项 制备滤纸条时,要剪去两角,这样可以减小边缘效应,使色素在滤纸上扩散均匀,便于观察实验结果。 收集滤液后,要及时用棉塞将试管口塞紧,防止滤液挥发。? 滤纸条上的滤液细线,不能触及层析液的原因:滤纸条上的滤液细线如触及层析液,滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中,实验就会失败。 提取和分离叶绿体色素的关键:(1)提取叶绿体色素的关键是:①叶片要新鲜、浓绿;②研磨要迅速、充分;③滤液收集后,要及时用棉塞将试管口塞紧,以免滤液挥发。(2)分离叶绿体色素的关键是:①是滤液细线要细且直,而且要重复划几次;②是层析液不能没及滤液线。 七、教学反思? 以学案导学为基础的探究式生物实验教学,遵循学生身心发展规律,让学生成为课堂的主人,同时,教师及时、有效的引导确保了探究效率。这种教学模式重视学生自主学习,且强调教师对学生的尊重和引导;不仅帮助学生掌握基本的实验操作技能,而且鼓励学生合作交流及创新,加深对知识的理解。 学生从“菜单”中选择感兴趣的问题进行探究,自主设计并实施实验方案,充分满足学生自我探索、自我思考、自我创新、自我表现的心理需求。通过对实验过程的理论分析和具体操作,培养学生逻辑思维的缜密性。同时,师生及时交流和分析实验结果,帮助学生初步形成创新性思维,提高合作力度。特别是学生在自制层析杯的过程中,切实接受环保教育,社会责任感无形中增强。 谢谢
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