细菌的特殊染色技术教学材料.pptVIP

细菌的特殊染色技术;一、目的要求;二、基本原理;荚膜是包裹在某些细菌细胞外的一层黏液状或胶状物质，含水量很高，其他成分主要为多糖、多肽或糖蛋白等。荚膜不易着色且容易被水洗去，因此常用负染法进行染色，而荚膜不着色，在深色背景下呈现发亮区域。 由于荚膜含水量高，制片时通常不用热固定，以免变形影响观察。;四、操作步骤; 成功的关键： （1）选用适当菌龄的菌种，幼龄菌尚未形成芽胞，而老龄菌芽胞囊已破裂； （2）加热染色时必须维持在染液微冒蒸汽的状态，加热沸腾会导致菌体或芽胞囊破裂，加热不够则芽胞难以着色； （3）脱色必须等待玻片冷却后进行，否则骤然用冷水冲洗会导致玻片破裂。 ;2、荚膜染色 1、取干净载玻片，在其上滴加 1d 绘图墨水，挑取少量菌体于其中混匀； 2、盖上盖玻片，镜检即可。（尽量不要混入空气） 成功的关键： （1）载玻片必须干净无油迹，否则混合液不能均匀铺开； （2）绘图墨水使用量要很少，否则会完全覆盖菌体与荚膜，难以观察； （3）制片过程中所涉及的固定及干燥步骤均不能加热和用热风吹干，因为荚膜含水量高，加热会使其失水变形。同时，加热会使菌体失水收缩，与细胞周围染料（或绘图墨水）脱离而产生透明的明亮区，导致某些不产荚膜的细菌被误认为有荚膜。 ;芽孢形状