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第二章 结构生物学的研究方法 生物大分子的计算机模拟 X射线晶体学 电子晶体学与电镜三维重构 多维核磁共振波谱学 各种谱学方法 电子晶体学与电镜三维重构 电子晶体学与电镜三维重构 概况 电子显微镜的基本知识 电镜三维重构的理论基础 有关的实验技术 应用实例 概况 目前广泛使用的术语 方法特点 膜蛋白结构测定的困难 电子晶体学与X-射线晶体学的比较 电子晶体学的历史 结构测定的一般步骤 概况 方法特点 分辨率：3~30 ?，大多数达不到原子分辨率 适用的样品：晶态或非晶态，复杂的大分子组装体 蛋白质的二维晶体 螺旋状分子复合物 纤维样品 单颗粒的大分子复合物（MW250kDa） 病毒 无相位问题，电镜像本身即包含振幅和位相信息 概况 膜蛋白结构测定的困难 PDB统计：内在膜蛋白 2003年3月 58 个 膜蛋白难于结晶 膜蛋白多是多重复合物，分子量大 概况 电子晶体学与X-射线晶体学的比较 X-ray EM 研究对象： 晶体 20um 微小晶体与薄膜，单颗粒，螺旋纤维 数据形式： 衍射数据 衍射数据，显微像 相位问题： 有 无 概况 电子晶体学的历史 20世纪30年代，原苏联的一个晶体学