基因工程-免疫共沉淀技术.pptVIP

目 录 一、基本概念 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，CO-IP）： 也称免疫共吸附或免疫下拉技术，利用抗原和抗体特异性结合以及细菌的Protein A/G 特异地结合到免疫蛋白 Fc 片段的现象开发出来的方法。 CO-IP是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 二、原理与应用 当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许 多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白 质x的抗体免疫沉淀x，那么与x在体内结合的蛋白质y也能沉 淀下来。经过洗脱，收集免疫复合物，然后进行SDS及Western blotting分析。 常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于 确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 免疫沉淀（immunoprecipitation）： 是利用抗体可与抗原特异性结合的特性，将抗 原（常为靶蛋白）从混合体系沉淀下来，初步分 离靶蛋白的一种方法。 免疫共沉淀（co-immunoprecipi