乙肝疫苗说明书.pdfVIP

重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母) 取种子批菌种扩增培养，采用适宜的方法将培养后 重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母） 的细胞破碎，测定破碎液的蛋白质含量（附录W B第二 法），并采用酶联免疫法或其他适宜方法测定HBsAg含 Chongzu Yixing Ganyan Yimiao (Niangjiu Jiaomu) 量。抗原表达率应不低于0.5%, Recombinant Hepatitis B Vaccine (Sa ccha romyces cerevisiae) = xm 抗原表达率（％) sm-?m 2. 1.4菌种保存 本品系由重组酿洒酵母表达的乙型肝炎（简称乙肝） 主种子批和工作种子批菌种应于液氮中保存，工作 病毒表面抗原（HBsAg)经纯化，加人铝佐剂制成用 种子批菌种于-70C保存应不超过6个月。 于预防乙型肝炎. 2.2原液 1基本要 求 2.2.1发酵 生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物 取工作种子批菌种，于适宜温度和时间经锥形瓶、种 等应符合凡例的有关要求. 子睐和生产«1进行三级发酵，收获的酵母菌应冷冻保存， 2 制 造 2.2.2培养物检定 2.1生产用菌种 2.2.2.1培养物纯度 2.1.1名称及来源 按2.1. 3.1项进行。 生产用菌种为美国默克公司以DNA重组技术构建的 2.2.2.2质粒保有率 表达HBsAg的重组酴酒酵母原始菌种，菌种号为2150 2- 按2.1.3. 3项进行，应不低于90%。 3 (pHBS56-GAP347/33)„ 2.2.3培养物保存 2.1.2种子批的建立 于- 60*C以下保存不超过6个月。 应符合生物制品生产检定用菌毒种管理规程 2.2.4纯化 规定。 用细胞破碎器破碎醸酒酵母，除去细胞碎片，以硅胶 由美国默克公司提供的菌种经扩增1代为主种子批， 吸附法粗提HBsAg,疏水色谱法纯化HBsAg,用琉氛酸 主种子批扩增1代为工作种子批。 盐处理，经稀释和除菌过滤后B卩为原«• 2.1.3种子批菌种的检定 2.2.5原液检定 主种子批及工作种子批应进行以下全面检定。 按3. 1项进行， 2.1.3.1培养物纯度 2.2.6原液保存 培养物接种于哥伦比亚血琼脂平板和癍化大豆蛋 白 于2~8C保存不超过3个月。 琼脂平板，分别于20~25C和30〜35*C培养5~7天，应 2.3半成 品 无细菌和其他真菌被检出。 2.3.1甲醛处理 2.1.3.2 HBsAg基因序列测定 原液中按终浓度为lOOjug/ml加入甲酵，于371C保温 HBsAg基W序列应与原始菌种21502-3保持一致。 适宜时间， 2.1.3.3质粒保有率