组合化学和高通量筛选.ppt

药物筛选 采用适当的方法，对可能作为药物使用的 物质（样品）进行生物活性、药理作用及药用价值的评价过程。 药用样品 筛选方法 （模型） 作用评价 发现药物 高通量筛选 以分子水平和细胞水平的实验方法为基础，以微板形式作为实验工具载体，以自动化操作系统执行实验过程，以灵敏快速的检测仪器采集实验结果数据，以计算机对实验数据进行分析处理，同一时间对数以千万样品检测，并以相应的数据库支持整体运转的技术体系 高通量筛选 高通量筛选的优点 快速----每天筛选上万药次 微量----筛选样品需要量为微克级 灵敏----准确判断筛选样品的活性和选择性 经济----筛选费用低 High throughput screening robots High Throughput Screening 96 384 864 1536 一、 高通量筛选技术的组成 化合物样品库 自动化操作系统 检测技术 数据库管理系统 高通量筛选模型 （一） 化合物样品库 人工合成 天然产物 组合化学合成 常规化学合成 （二）自动化操作技术 实验室自动化工作站 自动操作：加样、稀释、混合、温孵、转移等 自动检测：时间、顺序、条件等 数据获得：原始数据、简单处理数据 结果储存：计算机保存 （三）高灵敏度的检测系统 检测系统一般采用 液闪计数器 化学发光检测计数器 宽谱带分光光度仪 荧光光度仪等 （四）数据库管理系统 样品库的管理功能 生物活性信息的管理功能 对高通量药物筛选的服务功能 药物设计与药物发现功能 1、样品库的管理功能 样品各种理化性质存储管理 对每一个新入库的化合物进行新颖性分析，排除结构雷同的化合物 反应基团检测：排除假阳性 样品数据库信息表 生物活性信息的管理功能 存储每一化合物都要经过不同模型检测后的结果 根据多个模型的检测结果综合评价化合物的生物活性 对高通量药物筛选的服务功能 对与药物筛选相关的业务往来通讯、档案管理以及各种样品标签的打印进行管理，使高通量药物筛选的各个环节程序化、标准化。 药物设计与药物发现功能 对同一模型不同的呈现阳性反应的化合物结构进行分析，找出其构效关系，从而为药物设计提供参考。 （五） 高特异体外筛选模型 基本要求：微量化，高灵敏度，高特异性 基本类型： 分子水平模型：观察药物与分子靶点的相互作用，能够直接认识药物的基本作用机制。 细胞水平模型：药物对细胞的功能的影响 二、高通量筛选的技术过程 初 筛 复 筛 深入筛选 新药开发 临床前研究 临床研究 活性化合物 Active Compounds 确证筛选 活性样品 Hits 先导化合物 Lead compounds 候选药物 Candidate 高通量筛选的技术过程 初筛 在离体或活体水平上，使用同一剂量，与同样的试材作用，初步判断化合物有无活性 复筛 初筛后，选择有活性的化合物，采用系列浓度（设3-5 个剂量）进行同一模型的筛选，确定化合物活性大小 高通量筛选的技术过程 深入筛选 在初筛和复筛的基础上，将得到的化合物在与初筛不同但相关的模型上作进一步筛选 包括化合物的选择性、细胞毒性以及其他性质，为全面评价活性化合物的药用价值提供依据 高通量筛选的技术过程 确证筛选 对深入筛选获得先导化合物或优化后被选定的活性最好的化合物进行更深入的筛选 包括药理活性、药物代谢过程、一般毒性等 小结 组合化学 高通量筛选 选择=结果 汇报结束 谢谢观看！ 欢迎提出您的宝贵意见！ 第九章 组合化学和高通量筛选 第一节 组合化学 一、组合化学的基本原理 Combinatorial chemistry 将一些基本小分子构建模块（building block，如氨基酸、核苷酸以及化学小分子）通过化学或生物合成的手段，将他们系统的装配成不同的组合，由此得到大量具有结构多样性特征的分子，从而建立化学分子库的方法 组合化学 肽的合成 用20种天然氨基酸合成肽，组合起来有以下种： 二肽 202=400 三肽 203=8000 四肽 204=160,000 五肽 205=3200,000 二、组合库的构建方法 组合库（combinatorial library）是巨大数量的不同结构的化合物的贮藏和检索 平行法 裂分法 （一）平行法 在合成过程中以平行的方式同时合成多种反应产物。 1、多针法 将96只带有载体针的小棒固定在一块板上，其位置与96孔板对应 在96个孔中分别加入不同的反应物及试剂，即可同步合成96个样品 2、茶叶袋法（tea-bags） 化学惰性的多孔小袋子，大小15mm×20mm，网眼74μm，防止树脂珠漏出，保证可溶性物质进入 树脂珠上都连有一个保护的氨基酸，集