第二章生化反应动力学.pptxVIP

第二章 生化反应动力学;本章主要内容;一、单底物酶反应动力学;1、米氏方程;Henri中间复合物学说;Henri中间复合物学说图示;米氏方程;米氏方程的推导;米氏方程的三假设;Briggs-Haladane修正式;否定第三条假设;稳态学说;米氏方程的重新推导;2、米氏方程讨论;零级反应速度方程;一级反应速度方程;Km值;V＝Vm时，反应速度与酶和底物浓度的关系;k2k-1时，Km用作酶与底物亲和力度量;转换数TN;关于Km的总结;3、动力学常数Km和Vm的求取;酶反应速度与底物浓度的关系曲线;1/V-1/[S]图形;双倒数作图;⑴下图是根据[S]???0.33～2.0Km范围时的实验结果而作的双倒数图，从此图可准确地测量出-1/Km和1/Vmax等。;⑵ 如果所选底物浓度比Km大得多，则所得双倒数图的直线基本上是水平的。这种情况虽可测得1/Vmax ，但由于直线斜率近乎零， -1/Km则难以测得。;⑶如果[S]比Km小得多，则所作双倒数图的直线与两轴的交点都接近原点，使-1/Km 和1/Vmax ，都难以测准。;3.Hanes-Woolf作图法 即把米氏方程重排成线性方程;4.Woolf-Augustinsson-Hofstee作图法 将米氏方程重排为线性方程：;以上三种作图法也应注意选择底物浓度，不要使[S]比Km高得多或低得多。 上述几种线性作图法各有其优缺点。双倒数作图法应用