生物化学课件-第12章-翻译.ppt

信号肽引导真核分泌蛋白进入内质网 　　 　　 （二）线粒体蛋白的靶向输送 （三）细胞核蛋白的靶向输送 Tu Ts GTP GDP A U G 5 3 Tu Ts GTP （二）成肽 是由转肽酶（transpeptidase）催化的肽键形成过程。 （三）转位 延长因子EF-G有转位酶（translocase ）活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3’侧移动。 　 　 fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP 进位 转位 成肽 真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似，但有不同的反应体系和延长因子。 另外，真核细胞核蛋白体没有E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。 （四）真核生物延长过程 三、肽链合成的终止 当mRNA上终止密码出现后，多肽链合成停止，肽链从肽酰-tRNA中释出，mRNA、核蛋白体等分离，这些过程称为肽链合成终止。 终止相关的蛋白因子称为释放因子 (release factor, RF) 识别终止密码，如RF-1特异识别UAA、UAG；而RF-2可识别UAA、UGA。 诱导转肽酶改变为酯酶活性，使肽链从核蛋白体上释放。 释放因子的功能 原核生物释放因子：RF-1，RF-2，RF-3 真核生物释放因子：eRF 原核肽链合成终止过程 U A G 5 3 RF COO- 　 　　　原核生物蛋白质合成的能量计算 氨基酸活化：2个~P ATP 起始： 1个 GTP 延长： 2个 GTP 终止： 1个 GTP 结论：每合成一个肽键至少消耗4个~P。 多聚核蛋白体 （polysome) 一个mRNA分子可同时有多个核蛋白体在进行同一种蛋白质的合成，这种mRNA和多个核蛋白体的聚合物称为多聚核蛋白体。 蛋白质合成后加工和输送Posttranslational Processing Protein Transportation 第 三 节 从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性，必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。 主要包括 多肽链折叠为天然的三维结构 肽链一级结构的修饰 高级结构修饰 一、多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质 新生肽链的折叠在肽链合成中、合成后进行，新生肽链N端在核蛋白体上一出现，肽链的折叠即开始。可能随着序列的不断延伸肽链逐步折叠，产生正确的二级结构、模体、结构域到形成完整的空间构象。 大多数天然蛋白质折叠都需要其他酶和蛋白质的辅助。 几种有促进蛋白折叠功能的大分子 1. 分子伴侣 (molecular chaperon) 2. 蛋白二硫键异构酶 (protein disulfide isomerase, PDI) 3. 肽-脯氨酰顺反异构酶 (peptide prolyl cis-trans isomerase, PPI) （1）热休克蛋白(heat shock protein, HSP) HSP70、HSP40和GreE族 （2）伴侣素(chaperonins) GroEL和GroES家族 1. 分子伴侣 分子伴侣是细胞中一类保守蛋白质，可识别肽链的非天然构象，促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠。 热休克蛋白促进蛋白质折叠的基本作用： 结合保护待折叠多肽片段，再释放该片段进行折叠。形成HSP70和多肽片段依次结合、解离的循环。 HSP40结合待折叠多肽片段 HSP70-ATP复合物 HSP40- HSP70-ADP-多肽复合物 ATP水解 GrpE ATP ADP 复合物解离，释出多肽链片段进行正确折叠 伴侣素的主要作用: 为非自发性折叠蛋白质提供能折叠形成天然空间构象的微环境。 伴侣素系统促进蛋白质折叠过程 2. 蛋白二硫键异构酶（PDI） 二硫键异构酶在内质网腔活性很高，可在较大区段肽链中催化错配二硫键断裂并形成正确二硫键连接，最终使蛋白质形成热力学最稳定的天然构象。 3. 肽-脯氨酰顺反异构酶 多肽链中肽酰-脯氨酸间形成的肽键有顺反两种异构体，空间构象明显差别。 肽酰-脯氨酰顺反异构酶可促进上述顺反两种异构体之间的转换。 肽酰-脯氨酰顺反异构酶是蛋白质三维构象形成的限速酶，在肽链合成需形成顺式构型时，可使多肽在各脯氨酸弯折处形成准确折叠。 二、一级结构的修饰 （一）肽链N端的修饰 （二）个别氨基酸的修饰 （三）多肽链的水解修饰 鸦片促黑皮质素原(POMC)的水解修饰 N C 信号肽 PMOC KR KR 103肽 ( ？) ACTH ?-LT ?-MSH ?-MSH Endophin 三、高级结构的修饰 （一）亚基聚合 （二）辅基连接 （三）疏