尘螨分离技术的研究进展.docVIP

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热带医学杂志2010年9月第1卷第9期·综述·文章编号6721149-04尘螨为变应原中的一类是引起变态反应性疾病的诱因之一主要与哮喘、过敏性鼻炎、过敏性皮炎等的产生有密切的关联2。尘螨种类繁多能够对人类产生危害的主要有粉尘螨DermatophagoidesfarinaeHughes96、屋尘螨DermatophagoidespteronyssinusTrouessart1897、热带无爪螨BlomiatropicalisBronswijkCockOshima973、梅氏噬霉螨EuroglyphusmayneiCooreman950、腐食酪螨TyrophagusputrescentiaeSchrank78、粗脚粉螨AcarussiroL1758、家食甜螨GlycyphagusdomesticusDeGeer778等以屋尘螨和粉尘螨的致敏性最强危害最大2鉴于其对人类健康的危害和负面影响各种防螨产品在世界范围内相继面世另一方面针对其中部分产品例如纺织品一些国家出台了防螨性能检测标准35伴随着生物学与医学免疫学的快速发展越来越多的研究以尘螨作为实验材料因此尘螨分离技术的研究和应用也较广泛本文对目前已有的尘螨分离技术进行综述尘螨分离技术大致可分为三大类第一类利用提取液的比重使螨虫上浮而达到分离的目的第二类采用过筛水洗等方法达到分离的目的第三类利用习性达到分离的目的1第一类分离法11怀尔德曼烧瓶法2世纪中叶日本厚生省的《厚生省食品卫生检查指针》里介绍了怀尔德曼烧瓶法可检测食品和药品中的昆虫和螨虫67在三角烧瓶里放置一个带有金属柄的橡胶栓将待检样或者经试剂处理盐酸等的待测物取一定量放入其中加入其容量一半的水和12ml汽油后充分搅匀放置3min加入水使汽油层到达烧瓶颈部用橡胶栓摩擦烧瓶的内面后静置至水层与汽油层清晰分层待测样含螨混合物集中于交界液面拉起橡胶栓封住烧瓶的颈部使液面上的漂浮物倾斜流出放置滤纸通过布氏漏斗进行抽滤含螨物质被回收于滤纸上在体视显微镜下观察和挑取螨虫此法为经典方法高效缺点是常导致螨虫死亡或损伤虫体12饱和盐水漂浮法Sasa等79于96年创出了一种新的方法名为饱和盐水漂浮法该法操作简单可采用各种容量的三角烧瓶来进行操作回收后螨虫保持存活状态且回收率高此法较怀尔德曼烧瓶法为优具体操作为取30ml三角烧瓶口径20mm放入待测样23g加入05中性清洁液3ml后混匀加入比重约为2的饱和盐水ml充分搅拌加入饱和盐水至瓶口放置23min清洁液的添加使螨虫从待测样中分离因比重较小而漂浮于水面之上用体视显微镜观察烧瓶口的水面可发现漂浮的螨虫用有柄针或者毛笔捞起清除掉盐水后即可使用97年该作者对这个方法进行了扩展将其应用于分离成批培养的螨虫的操作中待测样是粉状动物饲料除加入抽滤等步骤外还添加了离心分离的操作其后Sakaki等对该法又进行了深入研究认为只回收上层液面中的螨虫不妥没有考虑其他部位残存的螨虫Sakaki将分离容器内的饱和盐水分为四个部分即上层中层内壁以及残留物旧法只回收了上层部分而其他部分的螨虫未被回收因而影响了最终的回收率经过改进后回收了全部液体和内壁清洗液获得了很高的回收率平均检出率高达923改进的方法被称为全层盐水分离法与原方法相比全层盐水分离法从饲料中回收螨虫检出率高达894而原方法只有349鉴于改进后的方法检出率高没有因检测样的不同而导致的检出率波动所需的实验器械与试剂较少成本低廉操作简便因此该作者认为全层盐水分离法可称得上是标准分离法13有机溶剂漂浮分离法另外Spieksma12和Oshima1316利用有机溶剂来产生不同比重的液体用以分离螨虫称之为有机溶剂漂浮分尘螨分离技术的研究进展裴伟1综述松冈裕之2审校1国家家具产品质量监督检验中心广东家具检测部防螨性能检测实验室顺德52832日本自治医科大学感染免疫学讲座医学动物学部枥木329498【摘要】尘螨的分离是寄生虫学领域科学研究与防治检测上的一项关键技术经过数1年的发展尘螨分离技术逐步趋于成熟并逐渐形成了三大类别即第一类分离法比重分离第二类分离法筛分离第三类分离法习性分离本文根据其发展状况及各自的特点作一综述【关键词】尘螨分离检测中图分类号R3844文献标识码A作者简介裴伟1969男湖北人医学博士主要从事生物安全检测食品安全风险评估等方面的研究工作1149··JournalofTropicalMedicineVol10No9Sep200离法。Spieksma采用饱和盐水、乳酸、四氯化碳等三种溶液配制出的不同比重的液体离心2500rmin5min离心后将上清和悬浊液依次进行抽滤达到在滤纸上依次展开以获取螨虫的目的Oshima则将四氯化碳和乙醚以不同比例混合得到各种比重梯度的混合液。如比重为206的分离液是四氯化碳5乙醚4的混合液46的分离液是四氯化

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