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职业教育医学检验技术专业教学资源库 第一节 血红蛋白测定 血红蛋白的分子结构 二、血红蛋白测定 卟啉环包着一个亚铁离子组成一个亚铁血红素，每条多肽链含一个亚铁血红素，每个血红蛋白分子有四个珠蛋白肽链 血红蛋白（hemoglobin，Hb或HGB）是红细胞的主要成分，由珠蛋白和亚铁血红素组成，每个Hb分子有4条珠蛋白肽链，分子量为64 458。 二、血红蛋白测定 Hb有多种形式及衍生物 HbO2 Hbred Hb MHb（Hi） HbCO SHb 二、血红蛋白测定 正常人Hb种类及含量 种类 多肽链组成 比例 HbA α2β2 大于90% HbA2 α2δ 2 约2-3% HbF α2γ2 小于1% 二、血红蛋白测定 1.原理 （一）HiCN测定法 RBC Hb Hi HiCN OD值 Hb（g/L）=KA λ=540nm 溶血 氧化 结合 计算 直接计算结果 此处K值为理论值，在实际应用中更多采用标准品参照，测定未知样品血红蛋白浓度 HiCN法测定血红蛋白标准曲线 制作标准曲线求得样品Hb浓度 ？ A:0.332，Hb=？ （二）其他测定方法 十二烷基硫酸钠法（sodium dodecyl sulfate hemoglobin，SDS-Hb） 碱羟血红蛋白法（alkaline haematin detergent，AHD575） 叠氮高铁血红蛋白法（HiN3） 溴代十六烷基三甲胺法（cetyltrimethyl ammonynm bromide，CTAB） 目前，自动血液分析仪已多使用不含氰化钾的血红蛋白测定方法 （三）质量保证 1．合格的标本 2．主要器材 分光光度计的波长、光栅、比色杯 3．HiCN转化液 的质量要求 4．HiCN参考液定标 5．开展室内质控 （四）方法学评价 测定方法 优点 缺点 HiCN测定法 参考方法，操作简单，反应速度快，可检测SHb之外的所有Hb，HiCN参考品可长期保存，便于质控 KCN试剂有剧毒，高白细胞、高球蛋白血症标本可致浑浊，对HbCO的反应慢，不能测定SHb SDS-Hb测定法 次选方法，操作简单，呈色稳定，试剂无毒，结果准确，重复性好 SDS质量差异大，消光系数未定，SDS易破坏白细胞，不适于同时进行白细胞计数的血液分析仪 AHD575测定法 试剂简易，无毒，呈色稳定，准确性与精密度较高；可用氰化血红素作校准品 575nm波长比色，不便于自动检测，HbF不能转化 HiN3测定法 反应迅速，呈色稳定，准确度、精密度较高 试剂有毒性（为HiCN的1/7），HbCO转化慢（20分钟） CTAB测定法 溶血性强且不破坏白细胞，适于血液分析仪检测 精密度、准确度略低 职业教育医学检验技术专业教学资源库