可见-紫外分光光度法.pptVIP

紫外—可见分光光度法 第一节 物质的吸收光谱 第二节 分光光度法基本原理 第三节 可见分光光度法 第四节 提高测量灵敏度 和准确度的方法 第五节 紫外分光光度法简介 目的要求 掌握分光光度法的基本原理——Lambert-Beer定律；吸光度及透光率、吸光系数、摩尔吸光系等概念、相互关系及计算。 熟悉标准曲线法及标准对照法。 了解吸收光谱的意义及绘制方法。 了解分光光度计的基本构造,提高测量灵敏度和准确度的方法。 了解可见分光光度法和紫外分光光度法的异同点。 分光光度法 根据物质的吸收光谱及光的吸收定律，对物质进行定性、λυ定量分析的一种方法。 第一节 物质的吸收光谱 一、物质对光的选择性吸收 一种物质呈现何种颜色，是与入射光的组成和物质本身的结构有关。溶液呈现不同的颜色是由溶液中的质点（离子或分子）对不同波长的光具有选择性吸收而引起的。 　　当白光通过某一有色溶液时，该溶液会选择性地吸收某些波长(wavelength)的光而让未被吸收的光透射过，即溶液呈现透射光的颜色，亦即呈现的是它吸收光的互补光的颜色。 　　例如：KMnO4溶液能选择吸收了白光中的绿光，与绿色光互补的紫色光因未被吸收而透过溶液，所以KMnO4溶液呈现紫色。 第一节 物质的吸收光谱 二．物质的吸收光谱 （A -λ图） 用不同波长(400-720nm)的光，照射某一吸光物质的溶液；测吸光度(A)，以波长?为横坐标，吸光度A为纵坐标得到的一条曲线，直观地表示出物质对光的吸收特征。 第一节 物质的吸收光谱 特点: ① 具有最大吸收波长。 ②不同物质吸收光谱的形状及λmax不同， ——定性分析的依据。 ③同一物质，浓度不同时，吸收光谱的形状相同，Amax 不同——定量分析的基础。 第一节 物质的吸收光谱 ④它反映某溶液对不同波长单色光的吸收程度。在最大吸收波长处测定吸光度，则灵敏度最高。 ⑤远离λmax的光,物质几乎不吸收光（A→0）,这些光的A与物质的c无直接关系----不作定量分析依据。 注意：物质对光的吸收越多，呈颜色 　　　越深， 溶液浓度越浓。 第二节????分光光度法?基本原理 一、透光率和吸光度 入射光 I0 ? 吸收Ia?透射It I0= Ia+ It 透光率 T = It/ I0 第二节????分光光度法?基本原理 I0?溶剂 ?I0, I0?溶液? It ∴ T = It / I0 透光率的负对数称为吸光度，用符号A表示。 A愈大，溶液对光的吸收愈多。 即：溶液的透光率愈大，表示它对光的吸收愈小；相反，透光率愈小；表示它对光的吸收愈大。 吸光度 A = -lgT = lg I0/ It 第二节????分光光度法?基本原理 二? Lambert―Beer 定律 当一束平行单色光垂直入射通过均匀、透明的吸光物质的溶液时，溶液对光的吸收程度与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。 A=kbc A-吸光度 k-比例常数 b-液层厚度 c-溶液的浓度 注意： Beer定律仅适用于单色光。 第一节???? 物质的吸收光谱 吸光度A与溶液的透光率的关系为 A = lg(1/T)= -lgT = lg(I0/I) = kbc 实验发现：溶液的浓度c愈大，液层厚度b愈厚，入射光愈强，则光吸收得愈多。 式中：A为吸光度；T为透光度，T=I/I0；I0为入射光强度，I为透射光强度；k为比例系数，k与吸光物质的性质、入射光波长及温度等有关；c为吸光物质浓度；b为吸收层厚度。 朗伯—比尔定律物理意义: 　　当一束平行的单色光垂直通过某一均匀的、非散射的吸光物质溶液时，其吸光度(A)与溶液液层厚度(b)和浓度(c)的乘积成正比。 　　朗伯—比尔定律不仅适用于溶液，也适用于均匀的气体、固体状态，是各类光吸收的基本定律，也是各类分光光度法进行定量分析的依据。 朗伯-比尔定律的适用条件： 　　1) 单色光：应选用?max处或肩峰处测定； 　　2) 吸光质点形式不变：离解、络合、缔合会破坏线性关系， 应控制条件； 　　3) 稀溶液： 浓度增大，分子之间作用增强。 吸光系数与摩尔吸光系数 　　朗伯-比尔定律A=kbc中的系数k因浓度c所取的单位不同，有两种表示方式： 　　(1)若c以g·L-1，b以cm表示时，常数k则以a表示，称为吸光系数，单位为L/(g·cm)。此时，朗伯-比耳定律为： 　　A＝abc。 　　(2)若c用mol ·L-1，b用cm表示，则k用ε来表示，称为摩尔吸光系数，单位为L·mol-1·cm-1 。这时，朗伯-比耳定律为： 　　A＝εbc。 ε与入射光波长λ