实验十 补体结合反应.docVIP

实验十 补体结合反应 目的要求 1．以鼻疽补体结合反应为例，了解补体结合反应术式的基本环节。 2．能独立运用本血清学反应的知识，作血清学检验。 操作步骤 一、材料准备 （一）溶血素 从兽医生物药品厂购买，保存于冰箱中，有效期1年以上，1月之内效价变动不大，1月可以测一次效价。 （二）补体 从兽医生物药品厂购买冻干补体，保存于冰箱，效价可半月测一次。也可以采3～4只成年雄性豚鼠血，分离血清，混合，保存于冰箱或冷处，24小时内应用。若检查材料多，需大量补体时，不从心脏采血，可由颈动脉放血于培养皿中，待血液凝固后移于冰箱次晨分离血清。如当日采血可直接离心分离血清。将混合的新鲜豚鼠血清， 加入NaCl达10％，置于冰箱或冷处，保存期可达数日或1周。 （三）绵羊颈静脉采血，盛于预先加玻珠的玻璃瓶中（或加有5％柠檬酸钠水溶液的玻瓶中），然后，将血分盛于离心管中，以每分钟1500～2000转离心10～15分钟，使红细胞下沉，吸弃上清液，加3～4倍生理盐水混合，再次离心，每分钟1500转15分钟。这样经第三次洗涤后，吸弃上清，将下沉的红细胞配成2.5％红细胞悬浮液（或临用前配制）。配制好的红细胞下沉液置5～10℃下保存，24小时内可应用。若发现溶血时需重新配制。 （四）鼻疽抗原 从兽医生物药品厂购买。 （五）标准血清 鼻疽阴、阳性血清由兽医生物药品厂购买。 （六）被检血清 采取被检动物