《手掌参内生真菌代谢产物抗菌活性的研究》-毕业设计（论文）.docVIP

lw lw lw 青海民族大学 毕 业 论 文（ 设 计 ） 论文题目：手掌参内生真菌代谢产物抗菌活性的研究 学生姓名： 学号： 指导教师： 职称： 院 系： 化学与生命科学学院 专业班级： 二○一二年四月廿五日 lw lw 摘 要 本论文应用琼脂扩散法对手掌参内生真菌702的代谢产物（水相、酯相）进行抗菌活性研究。结果发现乙酸乙酯相代谢产物对供试菌大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌有抗菌活性，对其他供试菌有无抗菌活性还有待进一步研究。 关键字：手掌参；内生真菌；代谢产物；抗菌活性 Asbtract In this paper application of agar diffusion method on the Gymnadenia conopsea endophytic fungus 702 metabolites (aqueous phase, the ester phase) are antibacterial activity research. The results found that ethyl acetate by metabolites on strains of Escherichia coli, Staphylococcus aureus has antimicrobial activity, to other strains showed no antibacterial activity. Key words: Gymnadenia conopsea; endophytic fungi; metabolites; antibacterial activity lw lw 1 引言 手掌参（Gymnadenia conopsea）含有多糖、苷类、菲醌类和芪类等多种活性成分，具有抗脂质过氧化、抗炎、抗过敏和免疫调节等多种药理作用。块根中含黏液液质、淀粉、蛋白质、糖分、草酸钙及无机盐。块根入药，具有补肾益精、滋补强壮、生津止渴、消瘀止血、理气止痛、解毒之功能，具有极佳的补气效果。主治病后体弱、虚劳消瘦、神经衰弱、肺咳嗽、益肾补脑、糖尿病、肺病、中毒、阳痿、失血、久泻、白带、跌打损伤、瘀血肿痛、乳少、慢性肝炎等症状。因此手掌参具有极高的药用疗效和保健作用。以进一步提高手掌参的临床应用价值，拓展应用范围，有效而充分地利用药材资源，保护生态环境，减少资源的浪费，本文着力于研究手掌参内生真菌代谢产物是否有抗菌活性，为开发新的保健食品与药品做好前期的准备。 2 材料与方法 2.1 材料 2.1.1 菌种 2.1.1.1手掌参内生真菌：702，从手掌参块茎中分离纯化得到。 2.1.1.2供试菌：从中检所购买的标准菌株。 大肠埃希菌（Escherichia coli）[CMCC（B）44102] 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）[CMCC（B）26003] 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）[CMCC（B）10104] 乙型溶血性链球菌（streptococcus hemdytis-β）[CMCC（B）32210] 藤黄微球菌（Micrococcus luteus）[CMCC（B）28001] 乙型副伤寒沙门菌（Salmonella paratyphy B）[CMCC（B）50094] 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）[CMCC（B）63501] 白色念珠菌（Candida albicans）[CMCC（F）98001] 黑曲霉（Aspergillus niger）[CMCC（F）98003] 2.1.2试剂 HCl(1mol/L)、NaOH (1mol/L)、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、蒸馏水等。 2.1.3仪器设备 ZHJH-1112C超净工作台、BCD-176XZ Haier冰箱、GHP-9050隔水式恒温培养箱、HZQ-X100A恒温振荡培养箱、TH-1060高温高压灭菌锅、TGL-16C高速离心机（台式）、SB-5200D超声波清洗机、GZX-9076MBE数显鼓风干燥箱等。 2.1.4培养基 2.1.4.1营养琼脂培养基（g/L）：用于抗菌活性测试（细菌）。 牛肉膏 3.0g，蛋白胨 10.0g，氯化钠 5.0g，琼脂 18.0g，蒸馏水 1000 mL，pH 7.2～7.4，121?C灭菌30min。 2.1.4.2改良马丁氏培养基（g/L）：用于抗菌活性测试（真菌）。 蛋白胨 5.0g，磷酸氢二钾 1.0g，酵母浸出粉 2.0g，硫酸镁 0.5g，葡萄糖 20.0