《新城疫病毒TS09耐热株在BHK细胞上的传代培养》-毕业设计（论文）.docVIP

新城疫病毒TS09耐热株在BHK细胞上的传代培养 摘要：以新城疫病毒（newcastle disease virus，ndv）ts09耐热株为研究对象，研究了该毒株在幼仓鼠肾传代细胞（bhk细胞）上的培养适应性。通过培养条件的优化、连续传代培养和极限稀释法纯化，获得了一株新的、纯化的、适应bhk细胞的ndv耐热株，命名为ts09-c株。ts09-c株的生物学特性测定结果表明，ts09-c株在bhk细胞中的增殖滴度为107.9 tcid50/ml，平均鸡胚致死时间（mdt）大于120 h，脑内致病指数（icpi）为0。与亲本株ts09株相比，ts09-c株的基因序列发生了较为明显的改变，但ts09-c株与亲本株仍保持着较近的遗传进化关系。 关键词：新城疫病毒（newcastle disease virus，ndv）；耐热；bhk细胞；传代 中图分类号：s852.65+9.5 文献标识码：a 文章编号：0439-8114（2012）23-5424-04 serial passages culture of newcastle disease virus thermostable ts09 strain in bhk cells wen guo-yuan1，shang yu1，2，guo jing1，2，yang jun1，wang hong-lin1，luo qing-ping1， zhang rong-rong1，shao hua-bin1 （1. institute of animal husbandry and veterinary， hubei academy of agricultural sciences， wuhan 430064，china； 2. college of veterinary medicine， huazhong agricultural university， wuhan 430070，china） abstract： the characterization study of newcastle disease virus （ndv） thermostable ts09 strain following serial passages in bhk cells was carried out. after optimization of the culture conditions， serial passages in bhk cells and purification by end-point dilutions， a newly purified， bhk cell-adapted ndv thermostable strain was developed， named ts09-c strain. results from the biological characterization tests showed that the titer of ts09-c strain in bhk cells was 107.9 tcid50/ml， mdt120 h and icpi was 0. it was demonstrated that there were a number of mutations in the genome of ts09-c strain， as compared with the ts09 strain. however， the close genetic relationships among the ts09-c and ts09 strains were observed. key words： newcastle disease virus（ndv）； thermostable； bhk cells； serial passages 新城疫病毒 （newcastle disease virus，ndv）为副粘病毒科（paramyxoviridae）副粘病毒属（paramyxovirus）成员，是有囊膜的负链rna病毒。由ndv引起的新城疫（newcastle disease，nd）是一种严重危害养禽业的高度接触性传染病，死亡率为90%以上，被国际兽疫局认定为两种a类禽病之一（另一种为禽流感）[1]。nd的防控以免疫预防为主，当前国际上生产和使用的nd疫苗有两大类，即活疫苗和灭活疫苗，活疫苗又包括低毒力和中等毒力活疫苗[2]。中等毒力活疫苗免疫效果优良，抗体一致性好，但对雏鸡、鸽和鹌鹑等有较强的毒副作用，此类疫苗免疫的禽肉不符合出口要求；灭活疫苗使用安全、免疫效果好，但需要肌肉注射，费工费时，免疫成本高，且影响禽肉品质，