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生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2009, July 25; 25(7): 1014-1021
journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061
cjb@im.ac.cn © 2009 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved
农业生物技术
1 1 1 1 2 2 3
王英娟 , 贾敬芬 , 步怀宇 , 赵宇玮 , 许耀 , Carl Hirschie Johnson , Jan Kolář
1 , 710069
2 Department of Biology, Box 1812-B, Vanderbilt University, Nashville, TN 37235, USA
3 Institute of Experimental Botany, Academy of Sciences of the Czech Republic, Rozvojová 135,165 02 Praha 6, Czech Republic
: 通过根癌农杆菌(含植物表达载体 YXu55)介导的转化技术, 将褪黑素生物合成酶- 芳烷基胺 N- 乙酰转移酶
(Arylalkylamine N-acetyltransferase, AANAT)与羟基吲哚O- 甲基转移酶(Hydroxyindole O-methyltransferase, HIOMT)基因
导入到烟草(秦烟95) 中。对所获得的庆大霉素抗性烟草株系进行Southern blotting 和RT-PCR 分子生物学检测, 结果表
明, AANAT-HIOMT 基因已成功地整合到烟草基因组中, 并且可以在 mRNA 水平上进行转录。用反相高效液相色谱法
(RP-HPLC)测定转化株系的褪黑素含量表明, 转 AANAT-HIOMT 基因烟草株系的褪黑素含量均明显高于 pZP122( 不含
AANAT 和HIOMT 基因的空白质粒)转基因株系和未转基因的对照植株, 证明AANAT-HIOMT 基因在转基因植株中的表
达增强了褪黑素的合成能力。对不同株系抗氧化系统的部分指标进行了测定, 并与其亲本对照植株比较, 发现
AANAT-HIOMT 基因在转基因植物中的表达引起超氧化物歧化酶(SOD) 、过氧化物酶(POD) 、过氧化氢酶(CAT)活性增
加, 谷胱甘肽(GSH)浓度以及总抗氧化能力升高, 且没有引起膜脂质过氧化物丙二醛(MDA) 的变化, 说明转基因烟草抗
氧化潜能得到提高。
: 烟草, 褪黑素, 褪黑素合成酶基因, 遗传转化, 抗氧化
Genetic transformation of Nicotiana tabacum L. by
Agrobacterium tumefaciens carrying genes in the melatonin
biosynthesis pathway and the enhancement of antioxidative
capability in transgenic plants
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