体外胚囊发育进程源自仅用乙醇曝置达成孤雌激活的体外成熟猪卵母.pdfVIP

．體外胚囊發育進程源自僅用乙醇曝置達成孤雌激活的體外成熟豬卵母細胞． 體外胚囊發育進程源自僅用乙醇曝置達成 孤雌激活的體外成熟豬卵母細胞 1* 2 1 林育安 蔡宏斌 陳銘正 1 宜蘭大學動物科技學系 2 宜蘭大學化學工程與材料工程學系 收到日期：100.1.24　 修訂日期：100.5.9　 接受日期：100.5.17 摘要 本試驗之 目的 ，乃研究不同濃度之乙醇(0 、3 、5 、7與9%)與選定濃度之乙醇(7 %)以不同時 間(0 、1 、3 、5與7分鐘)測試對體外成熟豬卵母細胞激活之影響 。豬卵母細胞經體外成熟培養48小時 後 ，分別置於不同濃度之乙醇各5分鐘與置於7%乙醇中各0 、1 、3 、5 與7分鐘 ，進行豬卵母細胞之 激活刺激 ，隨後並培於NCSU-23培養液養分別培養16小時與144小時觀察卵母細胞激活與胚發育情 形 。試驗結果呈現 ，7%乙醇分別以0 、1 、3 、5 與7分鐘對豬卵母細胞激活之卵分裂率分別為7 .6 、 12 .0 、44 .9 、63 .0與52 .3% ，以5分鐘組之胚發育比率最高(P 0 .05) ，胚囊發育比率也以5分鐘組最 高(P 0 .05) ，顯示體外成熟之豬卵母細胞可以僅用7%乙醇施以激活5分鐘的最佳處理條件 ，獲致顯 著的體外胚囊發育進展 。 關鍵詞：豬卵母細胞 、體外成熟 、孤雌激活 ＊通訊作者：林育安 宜蘭市神農路 1 號 (宜蘭大學 動物科技學系 辦公室) 電話：(03)9357400-7711 傳真：(03)9354794 手機：0921824380 154 E-mail：yalin@niu.edu.tw ．弘光學報65 期． 壹、前言 al., 2008) ，顯示卵母細胞以孤雌激活處理有較高 之胚囊率 ，不會像體外受精有多精入卵之問題 大部分 哺乳動物 自濾泡排 出成熟 的卵母 而影響後續胚之發育 。 細胞時 ，係處於第二次減數分裂中期階段 ，並 每種激活劑之激活機制都不一樣 ，例如 呈休止狀態(Marchal et al ., 2002) 。當精子與卵 Calcium ionophore (A23 187)是誘發卵母細胞內 母細胞之卵膜接觸時 ，會誘發卵母細胞 內Ca2+ 之鈣離子從貯存胞器中釋出以增加卵母細胞內 濃度增加(Marangos and Carroll , 2004) ，Ca2+會 之鈣離子濃度(Loi et al., 1998) 。電激活則是使卵 被攜鈣素(calmodulin)補捉並作用於依攜鈣素 母細胞之膜孔打開 ，讓外源性之鈣離子進入卵 蛋 白激酶 ，使依攜鈣素蛋 白激酶與蛋 白質激酶 母細胞內 ，以增加鈣離子濃度使卵母細胞被激 C (protein kinase C , PKC)被活化 ，之後會誘發 活(Simone et al ., 2004) 。在這些人工激活劑中 ， p34cdc2進行磷酸化作用 ，並使cyclin B (cyclin B) 乙醇除了是種價格很便宜且易購得之藥品外 ， 降解 ，結果使p34cdc2與cyclin B無法結合 ，導致細